什麼是反向點雜交

2021-03-05 09:21:35 字數 1033 閱讀 7293

1樓:小晨盈盈

反向點雜交:是將探針固頂在玻璃晶片或尼龍膜上,用於檢測擴增產物中是否含有目標基因的技術。

rdb是反向斑點雜交,此技術較為成熟,在國內應用較多,如hpv分型診斷試劑、地中海貧血診斷試劑等。inoge***ics的lipa系列產品(通過ce認證)均是基於rdb的原理。

rdb在本質上也是dna晶片(一般是中密度晶片)的一種,但它不同於一般所說的玻璃dna晶片,其訊號特異性強,簡便易行,技術要求低,儀器裝置投入小,檢測結果用肉眼就可直接判斷,而無需購買昂貴的鐳射掃描器,更符合中國國情也更利於在基層醫院推廣。

2樓:我愛丹丹

核酸雜交技術根據檢測目的和檢測手段的不同,可分為液相雜交、固相雜交及細胞內定位(原位)雜交。 固相雜交又可分為斑點雜交、凝膠電泳印跡轉移雜交。而 反向斑點雜交(reverrsedotblot,rdb)是saiki等提出的一種斑點雜交技術,該技術較正向斑點雜交和凝膠電泳印跡轉移雜交具有快速、簡便、高敏感性、特意性強的特點,尤其是基因分型、基因突變檢測,病原體的檢測等方面有其獨特的優勢。

反向斑點雜交利用生物素等標記的探針和特意性擴增pcr產物(靶dna序列)雜交。但是不同於一般的斑點雜交。一般的點印跡雜交是靶dna固定於硝酸纖維素膜或尼龍膜上,標記的探針和靶dna雜交顯色。

這種方法每次雜交反映只能判斷待測dna是否含有某一種探針的同源序列,對於某些基因座位可能含有十幾至幾十個等位基因(如hladrb位點或地中海貧血突變基因等),用這種點雜交方法就會很繁雜,甚至可能做不到。而rdb正是解決了這一難題。rdb是先將待用的探針分別點到硝酸纖維素膜或尼龍膜上,每個探針一個點並編上號,再將待測的dna樣本(一般是經pcr特意性擴增的產物,在pcr引物5』端預先進行生物素標記,使擴增產物相應標記有生物素)與之雜交,這樣待檢樣本就會與具有同源序列的探針結合,經洗滌去除未結合的dna樣本,由於待測的dna樣本具有生物素類的標記物,結合了待測dna的探針點上就帶有生物素類的標記物,再經相應的顯色反應就能顯出雜交訊號。

這樣一次就可以判斷某一基因座位的大部分或全部等位基因,因此利用這樣的工作原理還可以用於基因分型、病原體檢測、腫瘤研究等。

什麼是反向電動勢,怎麼解釋,詳細一點的

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三系雜交bai 水稻是水稻育du種和推廣的一個巨zhi 大成就,所謂三系是 dao 1 雄性不育系。雌蕊發育版正常,而雄蕊的權發育退化或敗育,不能自花授粉結實。2 保持系。雌雄蕊發育正常,將其花粉授予雄性不育系的雌蕊,不僅可結成對種子,而且播種後仍可獲得雄性不育植株。3 恢復系。其花粉授予不育系的雌...

什麼是克服不同生物遠緣雜交的障礙 通俗一點說

意思就bai是親緣關係較遠的兩個物種間 du由於有生zhi殖隔離,因此一dao般無法進行交配版生殖,或極難產生可育後代,即產權生可以產生有生殖能力的配子的後代,這就是遠緣雜交不親和。在說白了就比如牛羊之間能交配產生後代 小麥能和水稻雜交產生後代舉個例子,比如一個物種的基因型為aa,另一個物種基因型為...