實驗室準備採購,留作久用,請大家表達效率不錯的原核載體

2021-09-06 19:11:24 字數 621 閱讀 7155

1樓:匿名使用者

vp3是一種能特異性誘導惡性腫瘤細胞凋亡的病毒蛋白。由於它是一種不能透過細胞膜的大分子蛋白,目前主要通過真核表達載體將其基因匯入腫瘤細胞內表達而發揮作用。因轉基因操作困難、真核表達效率較低且其臨床應用的安全性近年來受到了質疑,因此如能在體外製備出vp3蛋白並通過有效的方法將其匯入腫瘤細胞內發揮作用,則能有效解決上述問題。

tat-ptd是一種能快速高效的將分子量為15 x 10~3~2 x 10~5的大分子蛋白跨膜轉匯入細胞內的多肽,改良型tat-ptd則是在tat-ptd的基礎上改良而來的高效跨膜轉導多肽,其跨膜轉導大分子蛋白的效率是tat-ptd的30多倍。因此如將上述兩者結合則可有效解決體外製備的vp3蛋白跨腫瘤細胞膜轉運的問題。 本**就改良型tat-ptd-vp3融合蛋白的基因合成、原核表達載體的構建及其原核表達進行了初步研究。

首先通過基因拼接法合成vp3基因並委託生物技術公司合成改良型tat-ptd基因。然後於原核表達載體pgex-6p-1上構建改良型tat-ptd-vp3融合蛋白的基因。最後將構建好的原核表達載體轉匯入基因工程菌dh-5α中並誘導其表達。

2樓:匿名使用者

把速自客信圾存罰,奪值到定重戲,後來因在的彈g,額滴來的d過每一個玩式,,不極場可能

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