1樓：教育小工匠老師
限制性內切酶在符合儲存條件的情況下放置久了不會影響酶切。
酶的催化活性會受其他分子影響：抑制劑是可以降低酶活性的分子；啟用劑則是可以增加酶活性的分子。有許多藥物和毒藥就是酶的抑制劑。
酶的活性還可以被溫度、化學環境（如ph值）、底物濃度以及電磁波（如微波）等許多因素所影響。
內切酶，即限制性核酸內切酶。亦稱限制性核酸酶。它是一種能催化多核苷酸的鏈斷裂的酶，只對脫氧核糖核酸內一定鹼基序列中某特一定位置發生作用，把這位置的鏈切開。
通過內切酶可以把某乙個遺傳基因切下來，若再連在別的細胞的遺傳基因上，便可使這細胞具有新的遺傳特性。內切酶的發現和採用，使基因工程成為可能。
有機體的生命活動表現了它內部化學反應歷程的有序性，這種有序性是受多方面因素調節的，一旦破壞了這種有序性，就會導致代謝紊亂，產生疾病，甚至死亡。酶活力受到調節和控制是區別於一般催化劑的重要特徵。
2樓：網友
什麼溫度放置？一般不會的，儘量-20度儲存。我用過期好幾年的內切酶做實驗也沒啥差別。。。
什麼是限制性內切酶？
3樓：乾萊資訊諮詢
限制性內切酶是能夠識別並附著雙鏈dna分子中特定脫氧核苷酸序列，並由此切割dna雙鏈磷酸二酯鍵的一類酶，並由此產生的兩種切割末端，粘性末端和平齊末端。
影響限制性內切酶活性的因素有多種，稍有不慎，可能就會導致酶切反應的失敗，除了常見的底物濃度、反應溫度等因素，還有以下三種需額外注意。
1、保護鹼基。
酶蛋白在進行切割時，需佔據識別位點兩邊的若干個鹼基，被稱為保護鹼基。
2、質粒高階結構。
部分限制性內切酶無法切割高階結構的質粒，這時候就需適當加大酶的使用量，或用可適應高階結構的限制酶線性化質粒後再行切割。
3、甲基化保護。
甲基化是細菌用來保消激護自己的基蔽橋襪因序列不被內源性內切酶切割的一種機制。常見甲基化：dam+、dcm+、ecoki+、ecobi+與cpg（真核細胞）等。
在實驗中一定要注意宿主細胞的甲基化資訊。
限制性內切酶與外切酶有什麼不同？
4樓：雜貨軒
兩者的區別：限制性內切酶的主要功能是保護細菌不受噬菌體的感染，而外切酶其水解的最終產物是單個的核苷酸（dna為dnmp，rna為nmp）。
核酸內切酶（endonuclease）：在核酸水解酶中，為可水解分子鏈內部磷酸二酯鍵生成寡核苷酸的酶，與核酸外切酶相對應。
外切酶：即核酸外切酶（exonuclease ）核酸外切酶是一類能從多核苷酸鏈的一端開始按序催化水解-磷酸二酯鍵，降解核苷酸的酶。
什麼是限制性內切酶？
5樓：中國農業出版社
限制性內切酶（restriction：endonuclease），是一類能夠識別雙鏈dna分子中的某種特定核苷酸序列，並由此切割dna雙鏈結構的核酸內切酶，切斷的雙鏈dna都產生5′磷酸基和3′羥基末端。
它們不同於一般的脫氧核糖核酸酶（dnase），切點大多很嚴格，要求專一的核苷酸順序，即識別序列。難以深入研究的dna大分子，藉此可以切割成特定的小片段來分析。限制性核酸酶的發現，為基因結構、dna鹼基順序分析和基因工程的研究開闢了新途徑。
6樓：竭智褚修謹
在生物體內有一類酶，它們能將外來的dna切斷，即能夠限制異源dna的侵入並使之失去活力，但對自己的dna卻無損害作用，這樣可以保護細胞原有的遺傳資訊。由於這種切割作用是在dna分子內部進行的，故名限制性內切酶(簡稱限制酶).限制酶是基因工程中所用的重要切割工具。
科學家已從原核生物中分離出了許多種限制酶，並且已經商品化，在基因工程中廣泛使用。
根據限制酶切割的特點，可將它們分為兩大類：一類是切割部位無特異性的；另一類是可特異性地識別核苷酸序列，即只能在一定的dna序列上進行切割。這種能被特異性識別的切割部位都具有迴文序列，也就是在切割部位，一條鏈正向讀的鹼基順序與另一條鏈反向讀的順序完全一致。
在基因工程中使用的多數是後一類酶。
如何提高限制性酶切的反應效率
7樓：匿名使用者
1 dna純度。
在dna樣品中若含有蛋白質，或沒有去除乾淨製備過程中所用的乙醇、edta、sds、酚、氯仿和某些高濃度金屬離子，均會降低限制酶的催化活性，甚至使限制酶不起作用。
2 核酸內切限制酶的緩衝液。
核酸內切限制酶的標準緩衝液包括氯化鎂、氯化鈉或氯化鉀、tris-hcl、巰基乙醇或二硫蘇糖醇(dtt)以及牛血清白蛋白(bsa)等。
使用所有限制酶均可發揮活性的一種緩衝液。
不同限制性內切酶對nacl濃度的要求不同，這是不同限制酶緩衝液組成上的乙個主要的不同。據此可分為高鹽、中鹽和低鹽緩衝液，在進行雙酶解或多酶解時，若這些酶切割可在同種緩衝液中作用良好，則幾種酶可同時酶切；若這些酶所要求的緩衝液有所不同，可採用以下三種方法進行消化反應：先用要求低鹽緩衝液的限制性內切酶消化dna，然後補足適量的nacl，再用要求高鹽緩衝液的限制酶消化；
先用一種酶進行酶解，然後用乙醇沉澱酶解產物，再重懸於另一緩衝液中進行第二次酶解。
3 酶切消化反應的溫度。
dna消化反應的溫度，是影響限制內切酶活性的乙個重要因素。不同的核酸內切限制酶，具有各自的最適反應溫度。多數限制內切酶的最適反應溫度是37℃，少數限制性內切酶的最適反應溫度高於或低於37℃。
4 dna的分子結構。
dna分子構型對核酸內切限制酶的活性有很大影響，如消化超螺旋的dna比消化線性dna用酶量要高出許多倍。
有些限制酶在消化它們自己的處於不同部位的限制位點，其效率也有明顯差異。
限制性內切酶反應的終止 通常是採用65℃條件下溫浴5min；
加終止反應液（如的edta使之在溶液中的終濃度達到10 mol/l）螯合mg2+，以終止反應。
限制性內切酶能否剪下DNA單鏈，限制性內切酶能切割DNA單鏈嗎？
不能，只能識別雙鏈dna的特定序列。不能，限制性內切酶只能識別具有迴文結構的4 6個鹼基對的雙鏈dna 答 不能，限制性內切酶只切雙鏈dna.原因 識別雙鏈dna上的特定序列。不一定是迴文結構 進行切割。不能，限制酶只能識別特定的迴文序列 限制性內切酶能切割dna單鏈嗎？限制性內切酶只能識別並切割特...
DNA連線酶，RNA聚合酶，限制性內切酶，解旋酶有屬於RNA酶的麼？核酶有哪些
這些全是蛋白質。沒有rna。解旋酶是解dna雙鏈的，核酶只在細胞核內發揮作用嗎 人們發現copy 並且掌握了核酶的分子機制 rna的自我拼接 端粒的結構和功能 dna序列重組等機理.這種原生動物的基因組功能分別由兩個細胞核執行,即二倍體的小核與生殖過程有關,而多倍體的大核決定細胞的基因轉錄,併為轉化...
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