凱氏定氮法一般做得做多長時間？

1樓：匿名使用者

我做蛋白一般要3個小時 1.稱重(約5g) 2.把凱氏燒瓶。

放在電磁爐。

上燒烤2小時（等裡面的硫酸變綠開始計時） 3.從電磁爐上把燒瓶拿下來，放半小時（用手摸瓶底，溫溫為止） 4.蒸餾125ml左右。

2樓：網友

你這裡說的肯定是蒸餾步驟，一般長的蒸餾8-10分鐘，如果蒸餾裝置功能強大，5min足矣。凱氏定氮包括消化（3-6h），蒸餾（4-10min），強酸滴定如果邊蒸餾邊滴定最快（1-5min）。那啥上搜正罡生物幫做吧，凱氏定氮服務。

強酸標定（包括乾燥碳酸鈉需要半天到一天）。自己做真的太麻煩，別問我怎麼知道的。

3樓：匿名使用者

你這描述的只是蒸餾步驟吧，一般蒸餾8-10分鐘足矣。凱氏定氮包括消化（3-6h），蒸餾（8-10min），強酸滴定（5min），強酸標定（包括乾燥碳酸鈉需要半天到一天）。

如果對自己測定結果不放心，可以對外送樣，**也不貴。比如**店鋪裡搜正罡生物凱氏定氮服務，樣品寄過去就行。

4樓：匿名使用者

用電熱爐半個小時可以完成實驗。

凱氏定氮法原理是什麼？

5樓：詩和遠方的自由者

凱氏定氮法是測定化合物或混合物中總氮量的一種方法。即在有催化劑的條件下，用濃硫酸硝化樣品將有機氮都轉變成無機銨鹽，然後在鹼性條件下將銨鹽轉化為氨。

隨水蒸氣餾出併為過量的酸液吸收，再以標準酸滴定，就可計算出樣品中的氮量。由於蛋白質含氮量比較恆定，可由其氮量計算蛋白質含量，故此法是經典的蛋白質定量方法。

從凱氏定氮原理可以知道：凱氏定氮法是將含氮有機物轉變為無機氮硫酸銨來進行檢測，以得到含氮量的測定值乘以一定係數得出蛋白質含量。而含氮有機物不僅僅是蛋白質，還有三聚氰胺等等。

在加上食品中蛋白質含量的現行國家標準和通行測定方法是經典凱氏定氮法。

這就為造假者提供了可乘之機。蛋白質中的含氮量不超過30%，三聚氰胺的zui大的特點是含氮量很高（66%），溶於水後無色無味，也就是說在一杯清水中加入三聚氰胺，然後用凱氏定氮法檢測，結果顯示是含有蛋白質的。

由於「凱氏定氮法」只能測出含氮量，並不能鑑定飼料中有無違規化學物質，所以，新增三聚氰胺的奶粉理論上可以測出較高的蛋白質含量。

應用。凱氏定氮法的普遍適用性、性和可重複性已經得到了的廣泛認可。它已經被確定為檢測食品中蛋白質含量的標準方法。

但是，這種方法並不能給出真實的蛋白質含量，因為所測定的氮可能不僅僅是由蛋白質轉化來的。

凱氏定氮法測定時需要注意什麼問題？

6樓：拋下思念

1）樣品應是均勻的。固體樣品應預先研細混勻，液體樣品應振搖或攪拌均勻。

2）樣品放入定氮瓶內時，不要沾附頸上。萬一沾附可用少量水衝下，以免被檢樣消化不完全，結果偏低。

3）硝化時如不容易呈透明溶液，可將定氮瓶放冷後，慢慢加入30%過氧化氫（h2o2）2-3ml,促使氧化。

4）在整個消化過程中，不要用強火。保持和緩的沸騰，使火力集中在凱氏瓶底部，以免附在壁上的蛋白質在無激扮消硫酸存在的情況下，使氮有損失。

5）如硫酸缺少，過多的硫酸鉀會引起氨的損失，這樣會形成硫酸氫鉀，而不與氨作用。因此，當硫酸過多的被消耗或樣品中脂肪含量過高時，要增加硫酸的量缺鍵。

6）加入硫酸鉀的作用為增加溶液的沸點，硫酸銅為催化劑，硫酸銅在蒸餾時作鹼性反應的指示劑。

7）混合指示劑在鹼性溶液中呈綠色，在中性溶液中呈灰色，在酸性溶液中呈紅色。如果沒有溴甲酚綠，可單獨使用甲基紅乙醇溶液。

8）氨是否完全蒸餾出來，可用ph試紙試餾出液是否為鹼性。

9）吸收液也可以用當量的酸代表硼酸，過剩的酸液用鹼液滴定，計算時，a為試劑空白消耗鹼液數，b為樣品消耗鹼液數，n為鹼液濃度，其餘均相同。

10）以硼酸為氨的吸收液，可省去標定鹼液的操作，且硼酸的體積要求並不嚴格，亦可免去用移液管，操作比較簡便。

11）向蒸餾瓶中加入濃鹼時，往往出現褐色沉澱物，這是由於分解促進鹼與加入的硫酸銅反應，生成氫氧化銅，經加熱後又分解生成氧化銅的沉澱。有時銅離子與氨作用，生成深l藍色的結合物[cu(nh3)4]2+

12）這種明知測算方法本質是測出氮的含量，再作蛋白質含量的估算。只有在被測物的組成是蛋白質時才能用此方法來估算蛋白質含量。,2,