1樓:受司大人
這個是根據實驗組來講的;
一般要求實驗組可能出現某種結果,這個你應該專明白吧?
陽性對照屬即是100%出現該結果的「實驗」組,材料是確定的;
陰性對照則是肯定不會出現結果的「實驗組」,材料也是確定的;
之所以加引號,是因為除了實驗需要驗證的變數,其他條件全部都是一樣的,用來排除其他實驗情況對結果產生的影響。
例如,驗證一轉基因玉米是否有抗藥性,需要選擇同種的轉基因成功的抗藥玉米做陽性對照,無轉基因的做陰性對照,從而保證除了該基因其他條件一致;
一個成功的實驗,通常情況下必須有陽性對照和陰性對照排除其他干擾情況
什麼叫陰性對照組
2樓:匿名使用者
比如測定一種藥品對小鼠的作用,實驗組小鼠的飼料中加了這種藥物,那就得在相同的實驗條件下飼養一組不加藥品的小鼠作為陰性對照,這樣,如果出現了明顯的不同,說明就是這種藥物導致的。
陰性對照是用來排除其他實驗因素對結果的影響。
什麼叫陰性陽性對照?
3樓:善百和
陰和陽是衡量器官的參照數比如溫度計0點為標準上升為陽性,下降為陰性,血上升為高,下降為低,身體標準是陰性一定值代表健康,一旦轉為陽說明出現了毛病陽引數赿高病赿重好比加號赿多赿重是一個道理。
流式細胞空白對照 陰性對照 陽性對照分別加什麼東西,各自用來做什麼
4樓:匿名使用者
流式細胞儀檢測的是相對值,所以必須要有各種對照來設定機器的引數和閾值。這個清單比較長。就你說的這三種,我可以說一下。
一般用熒游標記的抗體染色後,樣本有可能會出現兩個細胞群,一個陽性,一個陰性的,這樣的很好判斷。另外一種情況,就是整個細胞群的訊號在染色後發生了漂移,但是看不出陽性和陰性的分界。這時候,對照的作用就體現出來了。
所謂空白對照,就是沒有用熒光抗體染色的樣本,上機檢測後,也會得到訊號。這時候要調節pmt(也就是檢測器)的電壓,這樣對訊號的擴增就會發生變化。這個酶染色的樣本,就把訊號置於最低的位置。
如果是對數比例的訊號軸,一般是置於10的3次方以下的位置。
而陰性對照,就是已知沒有可被抗體識別靶分子的樣本。用熒光抗體染色後,訊號應該和空白對照相似。如果有很大的不同,說明抗體的非特異性結合很高,或者染色的步驟有問題。
而陽性對照,就是用已知肯定會有被抗體識別的靶分子的樣本。用熒光抗體染色後,應該會出現較強的訊號。這個樣本有兩個作用,一是出現強訊號後,可以適當調節pmt的電壓,讓訊號都位於可檢測範圍之內。
另外,如果沒有出現預期的訊號,那可能是抗體失效,或者染色方法有問題。那檢測的其他樣本的結果也就無效了。
elisa,陰性對照,陽性對照及空白對照是怎麼回事
5樓:南京金益柏
什麼是「有效性」(validity)?要獲得準確的檢測結果「有效性」評價,就會關係到:為什麼要設定「陰性、陽性和空白」等不可缺少的三項對照?
要用什麼樣的物質擔當「陰性、陽性和空白對照(品)」?這「三項對照」如何設定、需要設定幾個孔位?獲得的測定值如何「認可、取捨與計算」?
隨後,又如何依照陽性對照均值(pcx)與陰性對照均值(ncx)的差值(p-n,或n-p)大小做出「試驗結果有效性」的最終裁決呢?...等等。
elisa檢測,按照試劑說明書要求,每次試驗、每塊扳上都要設定以下3項對照和用途:
2.陰性對照(品):
(1)陰性對照(品)的概念與要求:所謂陰性對照(品),應當是本項檢測試驗中採用與待撿物(樣品、人用試劑就是人的血清等)具有同源性和同質性,又不含有待檢物質,並能客觀比較和鑑別處理因素(血清免疫學試驗中有特異性抗原與抗體反應)之間的差異。因此,用動物血清或其製品(如牛血清白蛋白等)代替陰性人血清作為對照品,從理論和實踐上都是不可取的,弊端甚多,無須細述。
注意:據我所知,國產elisa試劑中,有的廠牌是用動物血清製品稀釋配置、或與部分人血清混合配置的;其二,陰性對照讀數,並非是「越低越好」。ncx值接近0.
00x水平,這是假象!試想一下,真正採用「陰性人血清」的陰性對照品,ncx值會如此之低嗎?舉個例子,雅培乙肝六項eia試劑的ncx值,分別為:
0.010(hbsag)、0.027(抗—hbs)、0.
035(hbeag)、1.083(抗—hbe)、1.065(抗—hbc)、0.
045(抗hbc-igm)。生物梅里埃的hiv試劑ncx是0.091。
辨別試劑ncx值是否合理的一個很簡單的方法,只要對比大量陰性樣本的實際讀數就「一目瞭然」啦!
一個題外插曲:表明elisa試劑內在質量的一個重要統計標誌,就是要看:陰性樣本的的上限不應當大於、必須小於c.
o.i.=1.
00;反之,陽性樣本的的下限不可小於、應當大於c.o.i.
=1.00!
(2)陰性對照(品)分為兩類
一是代表受檢人血清中並不含有、或方法學靈敏度未能檢出的待檢物的基準水平,並且是結果判斷值(cut off)計算式中決定「是」(陽性)、或「否」(陰性)的唯一可變值。陰性對照值高,導致假陰性;反之,導致假陽性。如:
hbsag、hbeag、抗—hbc等。二是陰性對照設定,在方法學上要求加入指示性定量標準品,如中和劑hbeag,定量hbcag等,用以檢測抗—hbe、抗—hbc。或者,選取代表平均水平的正常人血清用作陰性對照,如檢測抗—hbc igm。
此類cut off 值計算時,多數均包括陰性和陽性對照值2個可變值。
3.陽性對照(品):
(1)陽性對照(品)的概念與要求:同陰性對照(品),只是採用「精選」的含有待檢物質的人血清製備而成。所謂「精選」,就是把收集的陽性人血清經過數種試驗進行「篩試」、把含有「干擾性物質」的血清剔除、不用,以避免出現「假陽性」干擾試驗結果。
(2)陽性對照(品)設定,也可區分為兩種型別與用途:
一是陽性對照主要用於評價該項試驗結果是否有效和試驗結果的穩定性與可比性。而所設的陽性對照的測量值不列入cut off值計算、但是不可不做。如hbsag、抗—hbs、hbeag等。
二是陽性對照的設定,不僅用於評價試驗結果是否有效和試驗結果的穩定性與可比性,而且計入cut off的計算。此時的cut off值的含義是代表該標誌物在健康(正常)人群中正常值範圍的上限。待檢樣本檢測值超過該上限(cut off)時表示有診斷意義。
例如抗—hbe、抗—hbc、抗—hbc igm等。
做pcr時陽性對照和陰性對照是什麼
6樓:我想我要
你好,這份好多種,要看你要
做對照的目的,比如你覺得有汙染不好,那就可以用陽性里加模板,陰性裡不加模板,不過一般做對照都是檢測引物,單雙引物檢測,一個只加一個引物,而另一個加一對,這樣可以檢測是否是單引物擴增,一般pcr結果條帶不單一才有必要做單雙引物對照的。希望對你又幫助!
7樓:宗政志強偶仙
假陽性是指不含目的片段的模板,經過pcr,批出了與目的模板bp數類似的片段,給人一種含有目的片段的假象.說明是汙染造成擴增的。
假陰性是說,你的樣品中有目的片段,但由於實驗條件不合適,沒有p出目的條帶,這種情況讓人誤以為是陰性,所以叫假陰性.說明反應體系中存在抑制物。
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