1樓:古道兮風瘦馬啊
溫育的溫度
和方式有哪些以及注意事項:溫育的溫度:育常採用的溫度有43、內37°C、室溫或4°C等。
37°C是實驗容室中常用的溫育溫度,也是大多數抗原抗體結合的最適反應溫度。抗原抗體反應一般在37°C經1~2h產物的生成可達頂峰,為加速反應,可在一定範圍內提高反應的溫度並在反應過程中連續振盪來增加抗原抗體接觸的概率。抗原抗體反應在4°C更為徹底,形成的產物、更穩定,但因所需時間太長,在elisa檢測中一般不予採用。
溫育的方式:溫育方式常採用溫箱法、微波輻射法和水浴法。其中水浴法能較好解決因受熱不均衡所致的周圍孔與**孔結果的吸光度差異(即「邊緣效應")。
可將elisa板置於水浴箱中,板底應貼著水面,使溫度迅速平衡,為避免蒸發,可用塑料貼封紙覆蓋板孔。若用溫箱,elisa板應放在溼盒內,溼盒要選用傳熱性良好的材料(如金屬等),在盒底墊溼的紗布,最後將elisa板放在溼紗布上。溫育過程中每塊反應板不能重疊放置,防止溫度擴散的不均勻性。
elisa實驗有什麼作用和意義 50
2樓:
大量樣本,同時檢測某種蛋白(指標)的多少,
意義,一組樣品中 每個個體 指標多少?有什麼變化趨勢。一目瞭然。
何謂elisa?簡述其原理及臨床意義
3樓:南京金益柏生物科技****
酶聯免疫吸附實bai驗(elisa) 即將已知的抗原du或抗體吸zhi附在固相載體表面,使酶dao標記的抗原抗體反應回在固相表面進行的技術答。該技術可用於檢測大分子抗原和特異性抗體等,具有快速、靈敏、簡便、載體易於標準化等優點。
基本原理
它採用抗原與抗體的特異反應將待測物與酶連線,然後通過酶與底物產生顏色反應,用於定量測定。測定的物件可以是抗體也可以是抗原。
在這種測定方法中有3種必要的試劑:1固相的抗原或抗體(免疫吸附劑) 2酶標記的抗原或抗體(標記物)3酶作用的底物(顯色劑)
測量時,抗原(抗體)先結合在固相載體上,但仍保留其免疫活性,然後加一種抗體(抗原)與酶結合成的偶聯物(標記物),此偶聯物仍保留其原免疫活性與酶活性,當偶聯物與固相載體上的抗原(抗體)反應結合後,再加上酶的相應底物,即起催化水解或氧化還原反應而呈顏色。
其所生成的顏色深淺與欲測的抗原(抗體)含量成正比。 這種有色產物可用肉眼、光學顯微鏡、電子顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(酶標儀)加以測定。其方法簡單,方便迅速,特異性強。
elisa的臨床意義,要根據具體的檢測物件來看,主要是檢測樣本的含量以及定性,僅供參考
在elisa檢測方法中,包被、封閉、洗滌分別代表什麼實驗過程?其主要作用是什麼? 20
4樓:
(1)單抗包被-抗原-酶標
bai二抗-底物顯色。本法du首先也是zhi用特異性抗體包被於固dao相載體內,經洗滌後加入含有抗原容之待測樣品,如待檢樣品中有相應抗原存在,即可與包被於固相載體上的特異性抗體結合,經保溫孵育洗滌後,即可加入酶標記特異性抗體,再經孵育洗滌後,加底物顯色進行測定,底物降解的量即為欲測抗原的量。(2)單抗包被-抗原-二抗-酶標二抗-底物顯色。
(改良雙抗體夾心法)本法首先是將特異性抗體a包被於固相載體,經洗滌加入含有欲測抗原之待檢樣品。經孵育洗滌後再加一次未標記的特異性抗體b,而這次加入的抗體b於第一次包被於固相載體上的特異性抗體a對被測抗原來說都是特異性的,但不是用同種動物免疫製備的,否則可出現非特異性反應。經孵育洗滌後,再加酶標記抗b抗體,再經孵育洗滌後加底物顯色進行測定。
這種方法與雙抗體夾心法不同之處是多加了一層抗體。因此,放大的倍數更高,故比雙抗體夾心法更加靈敏。同時避免標記特異性抗體,而另一優點是隻要標記一種抗抗體,即可達到多種應用。
在elisa檢測方法中,包被、封閉、洗滌分別代表什麼實驗過程?其主要作用是什麼?
5樓:
看技術實力.些商品化產品保質期9月.實驗放.應該加些穩定劑.
自用,所用配都書本,且封閉孔封,估計放月左右.
並且同,包蛋白,穩定性.抗體相說更穩定些.些雖蛋白,難說,月都定
elisa實驗方法
6樓:
包被抗原後加入待測抗體,反應後洗板,加入酶標二抗,反應後再洗板,加入底物顯色。
間接elisa方法主要用來檢測抗體,例如我們對動物進行免疫後要檢測抗血清的效價的話,就可以用間接elisa方法來測。
7樓:鬱悶的太陽
酶聯免疫吸附實驗(elisa) 即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,
版使酶標記的抗原抗體反應權在固相表面進行的技術。該技術可用於檢測大分子抗原和特異性抗體等,具有快速、靈敏、簡便、載體易於標準化等優點。
elisa實驗檢測抗體的實驗步驟
操作步驟 1 將特異性抗原 與固相載體聯結，形成固相抗原。洗滌內除去未結合的抗容原及雜質。2 加稀釋的受檢血清，保溫反應。血清中的特異抗體與固相抗原結合，形成固相抗原抗體複合物。經洗滌後，固相載體上只留下特異性抗體，血清中的其他成份在洗滌過程中被洗去。3 加酶標抗抗體,主要根據你的一抗來確定二抗用什...
簡述阿托品的主要藥理作用和臨床用途
1 阿托品是從顛茄和其他茄科植物提取出的一種有毒的白色結晶狀生物鹼c17h23no3。2 臨床用途 主要用其硫酸鹽解除痙攣 減少分泌 緩解疼痛 散大瞳孔。2 阿托品可競爭性拮抗乙醯膽鹼或膽鹼能受體激動藥對m受體激動作用。阿托品與m膽鹼受體結合後，由於其內在活性小，一般不引起激動效應，反而能阻斷乙醯膽...
混凝實驗中可劃分哪些階段主要作用
一般的混copy凝實驗應該劃分為三bai 個階段 一 加藥凝du聚階段 是指zhi在原水樣中投放含有一定性dao 化學反應藥劑,經機械攪拌至燒杯中的原水物質與藥劑完全混合後,達到互相碰撞凝聚成細微顆粒的一個過程,這個過程稱為,加藥凝聚階段。這個階段,一般會要求攪拌速度快一些。主要用作是 是後期礬花有...