1樓:匿名使用者
雙向瓊脂擴散試驗 是將半固體瓊脂傾注於平皿內或玻片上,待其凝固後,在瓊脂板上打孔,將抗原、抗體分別注入小孔內,使兩者相互擴散。如果抗原、抗體相互對應,濃度、比例適當,則一定時間後,在抗原、抗體孔之間出現清晰可見的沉澱線。雙向瓊脂擴散法可用來分析溶液中的多種抗原。
一對抗原、抗體系統只能形成一條沉澱線,不同的抗原抗體系統在瓊脂中擴散的速度不同,可在瓊脂中形成不同的沉澱線。本法主要是用於檢測血清中各種免疫球蛋白、甲胎蛋白、乙肝表面抗原等。缺點是需要時間過長,靈敏度不高。
2樓:匿名使用者
雙向瓊脂擴散試驗常用於定性檢測,也可用於半定量檢測。將抗原與抗體分別加入瓊脂凝膠板上相鄰近的小孔內,讓它們相互向對方擴散。當兩者在最適當比例處相遇時,即形成一條清晰的沉澱線。
根據有否出現沉澱線,可用已知的抗體鑑定未知的抗原,或用已知的抗原鑑定未知的抗體。臨床常用本方法檢查原發性肝癌患者血清中的甲胎蛋白,作為原發性肝癌的早期輔助診斷。
瓊脂擴散法有什麼別稱?
3樓:北京理工大學出版社
瓊脂擴散法又稱圓筒平板法。用於測定抗生素效價的生物學定量方法之一。標準的方法是以20毫升的瓊膠培養基放入陪替氏培養皿內做成平面,上面加上預先培養的試驗標準菌種,例如摻入了葡萄球菌的瓊膠4毫升,而使之凝固,上面再放上一個外徑8毫米的不鏽鋼圓筒,筒內倒滿青黴素稀釋液之後,在35~37℃培養12~16小時。
由於圓筒周圍產生濃度梯度,葡萄球菌的繁殖被阻止於有效濃度範圍之內而形成圓形的透明帶。其直徑d與青黴素濃度c之間的關係如下式所示:d=klog10c+a(k、a為常數)
與標準青黴素液相比較,可求得青黴素濃度。測定鏈黴素時用枯草菌,氯黴素用大腸菌,四環素用八連球菌作繁殖試驗。此外還有用圓形濾紙代替圓筒,使被檢液滲入的濾紙法。
對流免疫電泳與瓊脂雙向擴散試驗比較有何優點?
4樓:匿名使用者
由於電泳的作用,幫助抗體定向移動,加速了反應的出現。
而且也限制了瓊脂擴散時,抗原抗體向四周自由擴散的傾向,提高了敏感性。
本法比雙向擴散法的靈敏度要高10~16倍,而且反應時間短,可用於各種蛋白的定性和半定量測定。
振盪法,瓊脂擴散法和吸收法三者的區別
5樓:扶桑樹
雙向瓊脂擴散試驗常用於定性檢測,也可用於半定量檢測。
將抗原與抗體分別加入瓊脂凝膠板上相鄰近的小孔內,讓它們相互向對方擴散。當兩者在最適當比例處相遇時,即形成一條清晰的沉澱線。根據有否出現沉澱線,可用已知的抗體鑑定未知的抗原,或用已知的抗原鑑定未知的抗體。
臨床常用本方法檢查原發性肝癌患者血清中的甲胎蛋白,作為原發性肝癌的早期輔助診斷。
常用瓊脂擴散試驗的瓊脂濃度為多少?
6樓:廖佳一
1.材料和試劑
(1)ph8.6,0.1m巴比妥——巴比妥鈉緩衝液
巴比妥鈉 10.3 g
巴比妥 1.84 g
硫柳汞 100 mg(防腐劑)
蒸餾水加熱溶解並定容至500ml
(2)1%預復瓊脂(或瓊脂糖)
1g瓊脂(或瓊脂糖)加蒸餾水100ml溶化即可。
(3)1%瓊脂糖凝膠
1g瓊脂糖加50ml蒸餾水置水溶中煮沸溶解或用與波爐加熱溶解(注意不要溢位且注意加入蒸發的水),然後再加入50ml上述巴比妥緩衝液混勻,置4℃儲存備用。
(4)抗原及相應免疫血清。
單向瓊脂擴散試驗 是一種常用的定量檢測抗原的方法。將適量稀釋後的抗體與等量瓊脂混勻,澆注成板,凝固後,在板上打孔,孔徑3mm,孔間距10mm,孔中加入抗原,每孔10μl,放置溼盒中,37℃溫箱,抗原就會向孔的四周擴散,邊擴散邊與瓊脂中的抗體結合。24h-48h後觀察結果,在兩者比例適當處形成白色沉澱環。
沉澱環的直徑與抗原的濃度成正比。如事先用不同濃度的標準抗原製成標準曲線,則從曲線中可求出標本中抗原的含量。本試驗主要用於檢測標本中各種免疫球蛋白和血清中各種補體成分的含量,敏感性很高。
雙向瓊脂擴散試驗 測定時將加熱溶化的瓊脂或瓊脂糖澆至玻片上,等瓊脂凝固後,打多個小孔,將抗原和抗體分別加入小孔內,使抗原和抗體在瓊脂板上相互擴散。當二個擴散圈相遇,如抗原和抗體呈特異性的結合且比例適當時,將會形成抗原抗體複合物的沉澱,該沉澱可在瓊脂中呈現一條不透明的白色沉澱線。如果抗原與抗體無關,就不會出現沉澱線,因此可以通過該試驗,用特異性抗體鑑定抗原,或反之用已知抗原鑑定抗體。
另外沉澱線的特徵與位置不僅取決於抗原,抗體的特異性和濃度,而且與其分子的大小及擴散速度有關,當抗原體存在多種成分時,將呈現多條沉澱線以至交叉反應線,因此可用來檢查抗原和免疫血清的特異性、純度或濃度比較抗原之間的異同點,因而應用範圍較廣。
單向單擴散、單向雙擴散、雙向單擴散、雙向雙擴散的名詞解釋???
7樓:幾百次都有了
雙向免疫擴散是指可溶性抗原與相應抗體在瓊脂介質中相互擴散,彼此相遇後形成一定型別的特異性沉澱線。沉澱線的特徵與位置不僅取決於抗原抗體的特異性及相互間比例,而且與其分子大小及擴散速度相關。當抗原、抗體存在多個系統時,可呈現多條沉澱線乃至交叉反應。
依據沉澱線的形態、條數、清晰度及位置可瞭解抗原或抗體的若干性質,如濃度、特異性等。單向免疫擴散在含有特異抗體的瓊脂板中打孔,並在孔中加入定量的抗原,當抗原向周圍擴散後與瓊脂中抗體相結合,即形成白色沉澱環,其直徑或面積與抗原濃度呈正相關。同時用標準抗原或國際參考蛋白製成標準曲線,即可用以定量檢測未知標本的抗原濃度(mg/ml或u/ml)。
應用這一實驗方法可檢測正常人群或患者血清中igg、iga 及igm的水平。