1樓:青山悠悠
基因克隆是把
一個基復因通過制pcr複製出來,連線到載體上,再轉入大腸桿菌表達相應的蛋白。
轉基因是把某個基因連到相關的載體上(或者同源臂上),然後注入目標動物或者細胞,通過重組,使目標動物或者細胞帶有這個基因,就是把基因轉到了動物或者細胞上。
步驟太多了,給你說不清楚。想知道相關的東西,可以找相關的書看看。像((分子克隆))
為什麼我們基因克隆老失敗
2樓:匿名使用者
1 建議你直接切pcr產物,在酶切位點兩端加2~3個保護鹼基再切。這樣避免兩次純化的麻煩。我都是這麼做的。
2 你的t載體連線成功了麼?就是有沒有拿到重組t載體?
3 你用的是taq還是高保真聚合酶?如果是taq的話當心是在引物區或酶切位點造成點突變使得切不動。
3樓:沒改錯
反正我自己做的時候是 pcr切下來之後做純化,然後再連線t載體。然後轉化,再塗板。我比較落後,還用的是藍白斑 。就可以了。
基因克隆的基本步驟有哪些,基因克隆的方法主要有哪幾種,簡述各種方法的原理和用途
選擇目的基因,並設計相應引物 用引物pcr擴增目的基因片段 選擇合適 抗性標記 酶切位點等 的克隆載體 為了保真擴增 並將pcr片段連線入克隆載體中 一般用taq酶的pcr產物在末尾會自帶一個a,可在solution 1作用下與兩端各帶一個t的線性t載體直接相連 將連線產物轉化入感受態大腸桿菌,使之...
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