1樓：匿名使用者
一、目的不同
1、相對定量：是測定目的基因在兩個或多個樣本中的含量的相對比例，而不需要知道它們在每個樣本中的拷貝數。
2、絕對定量pcr：是一種在dna擴增反應中，以熒光染劑偵測每次聚合酶鏈鎖反應（pcr）迴圈後產物總量的方法技術
二、原理不同
1、相對定量：利用ct值與起始dna濃度的對數成反比的數學關係，來計算不同樣本之間的相對百分比。
2、絕對定量pcr：是利用熒光訊號的變化，實時檢測pcr擴增反應中每次迴圈擴增產物量的變化，通過迴圈閾值和標準曲線的分析對標本中起始模板拷貝數進行定量分析。
三、標準曲線不同
1、相對定量：可以做標準曲線，也可以不做標準曲線。
2、絕對定量pcr：實驗必須使用已知拷貝數的絕對標準品，必須做標準曲線。
2樓：匿名使用者
絕對定量是用已知濃度的標準品繪製標準曲線來推算未知樣品的量，絕對定量不同於相對定量，我們是驗室用biog kit做pcr實驗檢測目標rna，做下來ct值在28左右，s型曲線比較典型
3樓：匿名使用者
絕對定量是測定目的基因在樣本中的分子數目，即通常所說的拷貝數。而相對定量是測定目的基因在兩個或多個樣本中的含量的相對比例，而不需要知道它們在每個樣本中的拷貝數。
qpcr中的相對定量和絕對定量的區別
4樓：奔馬的香香豬
絕對定量是用已知濃度的標準品繪製標準曲線來推算未知樣品的量，絕對定量不同於相對定量，我們是驗室用biog kit做pcr實驗檢測目標rna，做下來ct值在28左右，s型曲線比較典型
5樓：匿名使用者
熒光絕對定來量中標準品：指
自用含有目的基因bai的質粒，知道質du粒的分子量和zhi濃度計算出拷貝數，然後dao倍比稀釋就作為絕對定量的標準品。
獲取：把目的基因p出來，然後接到質粒上，轉染搖菌擴增，然後再抽質粒，酶切純化。
最後把純化的目的基因做個鑑定。
絕對熒光定量pcr的資料分析
6樓：血盟孑孑
現在最常用的兩種分析實時定量pcr 實驗資料的方法是絕對定量和相對定量。絕對定量通過標準曲線計算起始模板的拷貝數；相對定量方法則是比較經過處理的樣品和未經處理的樣品目標轉錄本之間的表達差異。2－△△ct方法是實時定量pcr 實驗中分析基因表達相對變化的一種簡便方法，即相對定量的一種簡便方法。
本文介紹了該方法的推導，假設及其應用。另外，在本文中我們還介紹了兩種2－△△ct衍生方法的推導和應用，它們在實時定量 pcr 資料分析中可能會被用到。
希望對您有所幫助
熒光定量pcr儀，請問我是選相對定量還是絕對定量做
7樓：南京金益柏生物科技****
可以的。你把內參和目的基因都設成unknown，然後輸出資料，得到內參和目的基因的ct值。按照公式2-△△ct計算fold change就可以了。
就是有點麻煩，得自己算。我也是用abi7300絕對定量軟體做的相對。
real time pcr相對和絕對定量怎麼選擇
8樓：南京金益柏生物科技****
我也是剛剛開始這方面的試驗懂得不多。不知道你做的實驗是針對單個細胞的還是針對整個組織的。如果是針對單個細胞，用絕對定量比較精確，但如果你是針對一部分組織定量，那麼相對定量反而比較有優勢。
對於引物，其實有文獻是用大片段產物檢測的，效果也很好，（〉400bp）但是我們似乎都是從新設計了模版，這主要是考慮到擴增效率問題，以及退火溫度一致的問題，我想如果引物特異性確實比較好，那麼你不妨試試。小量的擴增一些，做一個融解曲線，看看是不是單一峰。
熒光定量pcr實驗相對定量法中的rq代表什麼意義
9樓：北京索萊寶科技****
rq：relative quantity，相對錶達量
rq min和rq max是置信區間，計算有點複雜，一般用不到，做圖一般用均值加標準差。
請問熒光定量pcr進行相對定量時，若是目的基因和內參基因擴增效率不一致，為什麼會導致結果的不準確？
10樓：匿名使用者
你先得弄清相來對定量什麼自
意思，舉個例子，樣bai品a和樣品b中檢測基因duy的表達水平，以b-actin為內
zhi參，相對定量就dao是用樣品a中的基因y的量除以b-actin得到值y1，用樣品b中的基因y的量除以b-actin得到值y2，然後y1/y2就是基因y在樣品a和b中的相對錶達水平。若基因y和b-actin擴增效率不一致，那麼y1/y2就不能反映實際情況了。
擴增效率是由退火溫度和引物效率決定的，需要試多個退火溫度和多對引物，希望有幫助
11樓：匿名使用者
相對定量有抄兩種方法。要求擴增效率相同的是δδct法，因為只有擴增效率相同目的基因與內參基因的ct值之差才是恆定的值，這是使用這種方法處理資料的前提，所以正式實驗之前要進行條件優化，這種方法的優勢是不用作標準曲線。如果擴增效率不同就要用另一種雙標準曲線法，這種方法需要標準品，稀釋不同的濃度梯度，作標準曲線，根據標準曲線得到你的拷貝數在進行資料處理，得到相對值。
希望能對你有幫助……
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