測定酶活力時為什麼要將酶液適當稀釋,一般稀釋多少倍

2021-03-03 21:24:17 字數 1731 閱讀 1546

1樓:匿名使用者

一方面濃度過高使反應進度過快使測定結果偏差過大。

另一方面還有產物抑制的原因。

稀釋倍數一般看所有用酶的存放時間和活力,而且要考慮單位換算的問題。不能一概而論。比如生提的gpt就不用。

2樓:匿名使用者

與酶提取前溶液中的[e]/[s]初值相同即可,不同的酶不一定。[e]:酶濃度[s]:底物濃度

3樓:匿名使用者

測定酶活力時,如果濃度過高反應就會太快看不到實驗現象,一般稀釋10到100倍。

4樓:緋色冰蘭

這得預實驗一下,用雙蒸水稀釋就行

測定酶活力時,為什麼要控制酶的稀釋倍數

5樓:匿名使用者

1.底物濃度 除選擇適合的底物外,在實際應用中更多考慮的是底物濃度。由於[s]與反應速度v成雙曲線關係,在酶活性測定時,要求[s]達到一定水平以保證酶活性與酶量成正比。

2.酶濃度 在反應條件一定時,酶濃度與反應速度成正比。按照中間產物學說,只有[s]>>[e]時,酶才能被底物分子飽和,反應速度才能達到最大值。因此當標本酶活力過高時,應將標本適當稀釋後再加以測定。

3.溫度 不同的酶最適溫度可以不同,多數酶的最適溫度在37~40°C。高於或低於最適溫度,酶活性都降低。

4.離子強度和ph值 在最適ph時,酶的活性最強,高於或低於最適ph,酶的活性都降低。

5 輔助因子 某些金屬離子和維生素類輔酶是結合酶的輔助因子。這些酶離開它們的輔基或輔酶就不能表現活性,因此在酶活性測定時,就要保證輔基或輔酶的供給。

6.啟用劑 有些酶在有啟用劑存在時才有活性或活性較高。因此在酶活性測定時也,要滿足酶對啟用劑的需要。

7.抑制劑 酶的抑制可分為不可逆抑制和可逆抑制,後者又可分為競爭性抑制和非競爭性抑制。重金屬離子和砷化物對巰基酶的抑制、有機磷對羥基酶的抑制屬於不可逆抑制;丙二酸對琥珀酸脫氫酶的抑制、磺胺類藥物對二氫葉酸合成酶的抑制屬於競爭性抑制;哇巴因對na+,k+-atp酶的抑制屬於非競爭性抑制.抑制劑使酶活性降低,在測定酶活性時,應避免抑制劑的影響。

為什麼當標本酶活力過高時,要將標本適當稀釋後再加以測定?酶活力高不是好事嗎?

6樓:匿名使用者

不知道bai你具體使用的什麼方法測酶活du,假zhi設你是用酶降解dao某種底物,反應一段時專間後,再利用這屬種底物的顯色反應或者特徵吸收峰來測酶活的這種方法。

那麼如果酶活過高,可能在小於規定時間內底物就被完全降解了,這樣實際酶活就無法測量了

所以酶活太高時要先稀釋,將實際反應的酶活控制在合理範圍內再測定。

希望對你有幫助,望採納

7樓:匿名使用者

反應速度太快,主要的化學反應特徵會無法觀察

計算酶活時稀釋倍數是怎麼計算的?

8樓:飛龍的守護

酶活是計算你的反應體系中總共加了多少酶液。你先把1ml稀釋成21ml,再取其中的1ml反應,所以你的反應體系中總共加了1/21ml酶液。

9樓:shie的家

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bai100ml濃度為2%(m/v),du稀釋倍數為50倍。 不過一zhi般來說酶的dao濃度不是這內

麼表示的。 我們用的酶容,比如dna內切酶 都是用 多少u/ul 作單位,u是活性單位。 你說的酶應該是蝸牛酶之類的粗品酶製劑。

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