1樓:浮華與膚淺
目的蛋白的表達跟基因本身關係密切,載體,表達條件關係也很大。空載體能表達不代表你的蛋白能在該條件下表達。
原核表達,為什麼空載表達的很好,目的蛋白沒有表達,可能的原因有什麼?
2樓:匿名使用者
目的蛋白的表達跟基因本身關係密切,載體,表達條件關係也很大。空載體能表達不代表你的蛋白能在該條件下表達。
3樓:
目的蛋白的訊號肽是否被宿主識別?
原來表達目的蛋白的菌株現在怎麼不表達了
4樓:匿名使用者
誘導表達沒有目的蛋白產生原因無非兩種 一是誘導條件不適合目的蛋白的表達,可通過改變培養基,溫度,誘導劑等條件重新摸索出合適的誘導條件。 二是目的蛋白的菌種有問題,可通過塗板挑選單克隆菌落重新培養,或者質粒重新轉化表達菌株等方法優化菌種。
原核表達第一次大量表達了目的蛋白但第二次表達出的目的蛋白就很少了為什麼
5樓:小楚
目的蛋白的表達跟基因本身關係密切,載體,表達條件關係也很大。空載體能表達不代表你的蛋白能在該條件下表達。
原核表達菌之前可以表達蛋白,為什麼放一段時間不表達蛋白了
6樓:匿名使用者
應該是原核表達宿主菌比較準確
原核表達宿主菌之前可以表達蛋白,放一段時間不表達蛋白原因很多首先要確認其他條件是否也有改變,比如其他基因,質粒載體,表達條件等等原核表達宿主菌儲存條件沒有控制好可能導致宿主菌退化,被汙染等等,結果就造成蛋白表達變少或者不表達。
原核生物中表達真核蛋白應該注意什麼問題
7樓:匿名使用者
因為原核生物缺乏復翻譯後的制修飾,所以表達的真核蛋白和真核中表達有所差異,可能沒有生物學活性等,但是要是做免疫原應該沒問題;
基因需為cdna,不能含有內含子,原核細胞不能對mrna進行剪下;
要分析dna序列資訊,分析其密碼子,由於原核與真核生物的密碼子偏好性不同,所以有時可能會出現稀有密碼子而影響表達的情況;
要注意你要表達蛋白的大小問題,一般情況下大於70kd的蛋白在原核菌種不容易表達或表大量低;
原核表達出來的一般是包涵體,所以蛋白的復性很關鍵,否則表達出來了也不能用,沒有活性。
做蛋白在真核細胞的表達,但是表達量很低,怎麼解決
8樓:匿名使用者
做蛋白在真核細胞的表達,但是表達量很低,怎麼解決實際上真核生物的蛋白也可以用
內真核細胞容蛋白表達系統來實現,而且效果往往更好。
用原核生物來表達主要還是因為操作簡單,快速。如果希望表達和純化的蛋白性質穩定,經原核系統表達之後仍然有正確的摺疊構象,那麼使用原核表達系統就很合適了。
有的時候在不同的表達體系裡面對蛋白的表達量是有影響的。
當構建完成後攜帶有訊號肽的時候,一些蛋白在真核表達體系中表達量極低。去除訊號肽序列值後,直接表達成熟肽,表達水平明顯提高。
所以說構建的真核表達載體高表達mrna卻檢測不到目的蛋白是完全有可能的。
做蛋白的原核表達時為什麼總是不穩定,明明上次已經有表達了,現在又老做不出來?
9樓:匿名使用者
這個很正常,我也碰到過,有時候是找不出原因的,只能再轉化,設定重新開始,篩選穩定的了。
10樓:匿名使用者
有的時候菌株也會有影響的
原核生物和真核生物在基因表達方面的異同
原核生物只有一種細胞器 核糖體 轉錄表達時合成的蛋白質無法進一步加工 真核生物含有多種細胞器 高爾基體 內質網 可以進一步加工修飾 原核生物與真核生物基因表達的區別 原核生物的機體能在基因表達過程的任何階段進行調控，如調控可在轉錄階段 轉錄後加工階段和翻譯階段進行。轉錄的調控主要發生在起始階段，這樣...
真核生物比原核生物基因表達的複雜性,表現在哪些方面
真核生物比原核生物基因表達的複雜性,表現在哪些方面 1 原核生物和真核生物基 回因表達調控的共同點答 a 結構基因均有調控序列 b 表達過程都具有複雜性,表現為多環節 c 表達的時空性,表現為不同發育階段和不同組織器官上的表達的複雜性。2 與原核生物比較,真核生物基因表達調控具有自己的特點 a 真核...
纖維蛋白原低什麼原因纖維蛋白原低怎麼辦
纖維蛋白原偏低的原因有 消耗過多，導致血漿含量減少 纖溶系統活性增強，fg被分解 合成減少 某些微量元素缺乏症等。原因 1 消耗過多，導致血漿含量減少，如dic等。2 纖溶 系統活性增強，fg被分解，如原發性纖溶亢進症等。3 合成減少，如重症肝炎，肝硬化等。纖維蛋白原是一種由肝臟合成的具有凝血功能的...