1樓:匿名使用者
葉綠素提取的準備工作是在一個半暗的房間裡,室溫保持在25℃。
提取步驟如下:
(1) 取1000克新鮮的綠葉,在韋氏攪切器中粉碎。
(2)將粉碎的1000克綠葉放進加有少量的碳酸鈣的丙酮中(溫度20℃)進行萃取,直到過濾、清洗後的葉子碎片為無色。
(3)將過濾後的丙酮提取液放到盛有1升石油醚和100ml丙酮的漏斗中,然後輕輕地旋轉,同時加放蒸餾水直到分層為止。水層的大部分丙酮和水溶雜質被丟棄,只剩石油醚溶液。
(4)將石油醚溶液用蒸餾水再次淨化後,用含有石油醚和0.01克草酸的200ml80%的甲醇溶液清洗5次以上,最後得到黃綠色懸浮液。
(5)用無水硫酸鈉對懸浮液進行乾燥,並將其滲入到3cm厚的蔗糖粉末製成柱中,然後用石油醚清洗沉澱的色素去掉類胡蘿蔔素,使之只含有天然的葉綠素。
(6)含有天然葉綠素的蔗糖柱分兩層,綠層有4-10mm的葉綠素b層,另一藍層為2-6mm的葉綠素a層。
(7)將位於藍層正中的部分(約佔藍層的一半) 放入醚中,對此懸浮液進行過濾、洗提,用蒸餾水清洗,用硫酸鈉乾燥,再用器皿進行過濾後,得到葉綠素a。
(8)將(6)中的綠層中間部分移出,迅速放入醚中過濾、洗提,製成葉綠素b醚溶液。
2樓:黃曉鼕鼕
一般考點
1、加入二氧化矽的原因:有利於充分研磨
2、加入碳酸鈣的原因:防止色素破壞。研磨時會破壞溶酶體,溶酶體裡面的有機酸會流出來而色素中有mg,碳酸鈣能和酸反應,防止酸和鎂反應,破壞了色素。
3、加入無水乙醇的原因:光合色素易溶於無水乙醇等有機溶劑中,可以用無水乙醇提取綠葉中的光合色素。
4、層析液的作用:光合色素可溶於層析液中,不同的光合色素在層析液中的溶解度不同。溶解度高的光合色素隨層析液在濾紙上擴散得快;溶解度低的光合色素在濾紙上擴散得慢。
這樣,最終不同的光合色素會在擴散過程中分離開來。
(1)提取光合色素
用天平稱取5 g綠色葉片,剪碎,放入研缽中。向研缽中放入少量二氧化矽和碳酸鈣,加入10 ml無水乙醇(也可用丙酮),迅速、充分地研磨。在玻璃漏斗基部放一塊單層尼龍布,將漏斗插入試管。
將研磨液倒入漏斗,及時用棉塞塞嚴盛有濾液的試管。
①剪碎和加二氧化矽的作用:利於研磨充分
②加入碳酸鈣的原因:防止色素破壞。研磨時會破壞溶酶體,溶酶體裡面的有機酸會流出來而色素中有mg,碳酸鈣能和酸反應,防止酸和鎂反應,破壞了色素。
③加入無水乙醇(丙酮)的原因:光合色素易溶於無水乙醇等有機溶劑中,可以用無水乙醇提取綠葉中的光合色素。
④迅速研磨:防止乙醇揮發和色素的破壞。
⑤單層尼龍布的作用:過濾、去除雜質。
⑥用棉塞塞嚴的原因:防止乙醇(丙酮)揮發、提取液變少、變幹。
(2)製備濾紙條
將乾燥的定性濾紙剪成長與寬略小於試管長與寬的濾紙條,將濾紙條一端剪去兩角,在此端距頂端1 cm處用鉛筆畫一條細橫線。
①濾紙條的長與寬略小於試管:既能使濾紙條輕鬆地放入試管內,易於取出,也能防止濾紙條太小,彎曲塌陷在試管內。
②剪去濾紙條兩角的作用:1.保證濾紙能立在燒杯中2.保證濾紙上的濾液線能水平向上擴充套件。
③1 cm:保證濾紙條有足夠的長度泡在層析液中,又能使色素帶不浸在層析液(分離液)中。
④用鉛筆,不能用簽字筆、圓珠筆、畫筆的原因:簽字筆、圓珠筆、畫筆的筆液色素會也能溶於乙醇和層析液,汙染從綠葉中提取的色素。
(3)畫濾液細線
用毛細吸管吸取少量濾液,沿鉛筆線均勻畫細線(也可用玻片較短那一端的邊緣沾取濾液後,印在濾紙條上)。待濾液線幹後,重複畫線一兩次。
①濾液線要細,要均勻:保證濾液色素在同一起始點上。
②待濾液線幹後再重複畫線的原因:既保證了濾液線的色素量,也防止濾液線過寬。畫的次數越多,色素量越多,越好跑,色素帶也就分得越開,越清楚。
(4)分離光合色素
將適量的層析液(分離液)倒入試管,將濾紙條畫線一端朝下,輕輕插入層析液中,迅速塞緊試管口。
①適量的層析液:保證足量用於色素的分離,防止層析液浸沒濾液線,也防止空氣汙染(層析液易揮發、有毒),避免試劑的浪費。
②層析液的作用:色素可溶於層析液中,不同的色素在層析液中的溶解度不同。溶解度高的色素隨層析液在濾紙上擴散得快;溶解度低的色素在濾紙上擴散得慢。
這樣,最終不同的色素會在擴散過程中分離開來。
③注意不要讓層析液觸及濾液線。接觸後會使大量濾液溶於層析液中,導致實驗失敗。
④塞緊試管口的原因:層析液易揮發,且具一定的毒性。
(5)觀察、記錄
待層析液上緣擴散至接近濾紙條頂端時,將濾紙條取出,風乾。觀察濾紙條上所出現的色素帶及其顏色,並做好記錄。
最後濾紙條上將分離出四條色素帶,顏色從上往下分別是橙黃色、黃色、藍綠色和黃綠色,四種色素分別是胡蘿蔔素、葉黃素、葉綠素a和葉綠素b。
3樓:匿名使用者
1、加入二氧化矽的原因:有利於充分研磨
2、加入碳酸鈣的原因:防止色素破壞。研磨時會破壞溶酶體,溶酶體裡面的有機酸會流出來而色素中有mg,碳酸鈣能和酸反應,防止酸和鎂反應,破壞了色素。
3、加入無水乙醇的原因:光合色素易溶於無水乙醇等有機溶劑中,可以用無水乙醇提取綠葉中的光合色素。
4、層析液的作用:光合色素可溶於層析液中,不同的光合色素在層析液中的溶解度不同。溶解度高的光合色素隨層析液在濾紙上擴散得快;溶解度低的光合色素在濾紙上擴散得慢。
這樣,最終不同的光合色素會在擴散過程中分離開來。
高中生物課本實驗「葉綠體中色素的提取和分離」中,用丙酮提取葉綠體中色素的時候是否也可以提取到花青素
4樓:望桂花鈄俏
丙酮可以提取花青素,但提取綠葉中的色素時,用的綠葉中沒有花青素,花青素主要存在於花瓣細胞的液泡中,所以在葉綠體色素的提取實驗中,不可能提取到花青素,當然在濾紙上沒有花青素的色素帶。清楚不?
高中生物:綠葉中色素的提取和分離的實驗中,不加caco3,葉綠素會被破壞,那麼其它色素會被破壞嗎?
5樓:匿名使用者
會,因為研磨後大液泡破裂,酸性物質被釋放,破壞葉綠素,當然,也破壞了其他的色素,比如,花青素。當然也有真心破壞不了的(葉黃素)這也就是為什麼大多數死亡的樹葉都是枯黃色。
歡迎追問,求採納
6樓:
會破壞。細胞破壞後,酸性的細胞液中的氫能將葉綠素中的鎂置換出來,導致色素被破壞。所以加碳酸鈣的目的是為了中和這種酸性環境,保護色素。
[高中生物]葉綠素中色素的提取與分離實驗中乙醇濃度問題
7樓:匿名使用者
葉綠體中色素的提取與分離實驗中應該用無水乙醇,因為葉綠體色素不溶於水,有水會影響色素的溶解,使實驗提取液色素含量減少,實驗效果變差。沒有無水乙醇時用95%乙醇代替但要加無水碳酸鈉,是為了吸去水分,變成無水乙醇。
8樓:奧力奧
這兩個濃度都是可以的。
在綠葉中色素的提取和分離實驗中,最好使用無水乙醇,這樣提取色素效果好。
如果沒有無水乙醇,用95%的乙醇也是可以的,再加一些碳酸鈉來除去水即可。
9樓:聽風
確認過,是無水乙醇。這是教材截圖。
10樓:匿名使用者
黃酮類化合物般屬於親水性化合物,建議採用ph梯度萃取. ()黃酮苷類提取----破壞酶 1.沸水提取 2.
乙醇提取 3.石灰水提取(二)黃酮苷元類提取 ◆ 直接提取 1.沸水提取 2.
乙醇提取 3.鹼水提取 4.親脂性機溶劑提取 ◆ 酸或酶解再提取 :
(例) 1藥粗粉,乙醇 流提取3 2乙醇提取液 3收濃縮液 4加水稀釋氯仿萃取3 5ph梯度萃取 答案補充 65% 這樣的提問沒有意義建議自己下去查查資料
高中生物(人教版)的綠葉中色素的提取與分離實驗有個地方不明白
11樓:匿名使用者
不能讓濾液細線觸及層析液,是防止色素會溶於(在杯中的)層析液,實驗原理是色素在(巨集吸至展板上的)層析液中的溶解度不同。
12樓:永不褪色
我是高三學生!
這個實驗用到的是紙層析法,是層析紙吸收液體,而色素溶解於液專體中,就會
屬跑到紙上形成色素帶(此液體為有機溶劑丙酮)。
不能讓濾液細線觸及層析液,是為了防止已經在紙上的色素又溶解於溶液,而導致色素帶不清楚甚至模糊混亂
還有色素溶解於有機溶劑,這裡用的是丙酮,他能溶解色素,因為色素的擴散速度不同(順序為胡蘿蔔素最快,葉黃色,葉綠素a,葉綠素b),所以形成間隔的色素帶(其中胡蘿蔔素的色素帶最寬,葉綠素b的最窄。。。。寬窄值得是縱向的)
我的解釋可能不是很清楚,請你見諒!
解釋僅供參考!如有錯誤請指正,我們共同學習!
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