1樓:血魔法師
flag標籤蛋白
flag標籤蛋白為編碼8個氨基酸的親水性多肽(dykddddk),同時載體中構建的kozak序列使得帶有flag的融合蛋白在真核表達系統中表達效率更高。 flag作為標籤蛋白,其融合表達目的蛋白後具有以下優點:
flag作為融合表達標籤,其通常不會與目的蛋白相互作用並且通常不會影響目的蛋白的功能、性質,這樣就有利用研究人員對融合蛋白進行下游研究。
融合flag的目的蛋白,可以直接通過flag進行親和層析,此層析為非變性純化,可以純化有活性的融合蛋白,並且純化效率高。
flag作為標籤蛋白,其可以被抗flag的抗體識別,這樣就方便通過western blot、elisa等方法對含有flag的融合蛋白進行檢測、鑑定。
融合在n端的flag,其可以被腸激酶切除(dddk),從而得到特異的目的蛋白。因此現flag標籤已廣泛的應用於蛋白表達、純化、鑑定、功能研究及其蛋白相互作用等相關領域。
一個什麼公司的產品介紹裡的 找不著連結了就不貼引用了
說白了就是做表達出來的蛋白的一個標籤
2樓:匿名使用者
flag tag用於表達重組蛋白,便於western檢測。
flag標籤作用 5
3樓:
可以通過基因工程技術手段將所要研究的目的基因和flag-tag基因序列連線起來,可以連線在目的蛋白的c端或n端, 然後將整合後的基因轉入細胞中或胚胎幹細胞抑或受精卵中。
後續檢測主要通過flag-tag這段肽鏈形成的免疫決定簇與其單克隆抗體的特異性結合來實現。 檢測手段有免疫熒光(immunofluorescence), 免疫印記(western blotting)等。
隨著生物技術的發展,科研人員可以通過dna重組技術,構建包含目的基因以及表位標記的融合蛋白,進而通過特異性標籤抗體對其鑑定與純化,以達到研究的需求。
擴充套件資料
flag-tag類別:
1、flag抗體-抗flag標籤抗體
融合標籤,如flag、gst等標籤的使用可以簡化蛋白質的純化過程、控制蛋白質固定的空間取向及方便檢測、使體內生物事件視覺化、提高重組蛋白質的產量、增強重組蛋白質的可溶性和穩定性等。
2、gst抗體-抗gst標籤抗體
隨著越來越多的新基因的發現,基因融合蛋白表達體系以其在新發現蛋白研究中的顯著優勢已得到廣泛應用。其中gst標籤體系具有蛋白表達產率高、表達產物純化方便,以及利於gst抗體制備等特點。
3、ha抗體-抗ha標籤抗體
融合標籤,如ha、his等標籤的使用可以簡化蛋白質的純化過程、控制蛋白質固定的空間取向及方便檢測、使體內生物事件視覺化、提高重組蛋白質的產量、增強重組蛋白質的可溶性和穩定性等。常用的標籤包括myc、ha、flag、his、gst等。
4樓:s小作者
flag標籤蛋白為編碼8個氨基酸的親水性多肽(dykddddk),同時載體中構建的kozak序列使得帶有flag的融合蛋白在真核表達系統中表達效率更高。 flag作為標籤蛋白,其融合表達目的蛋白後具有以下優點:
· flag作為融合表達標籤,其通常不會與目的蛋白相互作用並且通常不會影響目的蛋白的功能、性質,這樣就有利用研究人員對融合蛋白進行下游研究。
· 融合flag的目的蛋白,可以直接通過flag進行親和層析,此層析為非變性純化,可以純化有活性的融合蛋白,並且純化效率高。
· flag作為標籤蛋白,其可以被抗flag的抗體識別,這樣就方便通過western blot、elisa等方法對含有flag的融合蛋白進行檢測、鑑定。
· 融合在n端的flag,其可以被腸激酶切除(dddk),從而得到特異的目的蛋白。因此現flag標籤已廣泛的應用於蛋白表達、純化、鑑定、功能研究及其蛋白相互作用等相關領域。
希望對你有幫助哦~^^~
flag tag抗體會和內源的蛋白結合嗎
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