1樓：匿名使用者
這個方法看凋亡，主要是看sub-g1期的細胞數量。原理就是凋亡的細胞，由於dna正在降內解，所以含量比正容
常細胞要少。
在以pi熒光強度（代表dna量）為橫座標的柱狀圖上，一般會有2個峰，g1和g2，g1就是正常細胞，g2是正在**的2倍體。2者間是s期細胞。如果有凋亡的細胞，在g1前會有細胞出現，就是dna含量少於正常細胞的凋亡細胞。
2樓：齊進訾昆琦
基本bai原理
流式細胞儀檢測細胞凋亡
du：pi單染色法其原
zhi理主dao
要是根據細胞凋亡時在細胞、亞版細胞和分子水權平上所發生的特徵性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變最具特徵性，主要包括以下幾個方面：
1、細胞核的改變
由於凋亡細胞核的改變，造成各種染色體熒光染料對凋亡細胞dna可染性發生改變。研究表明，用各種染色體熒光染料對經固定的凋亡細胞進行染色，其dna可染性降低。許多學者把這種dna可染性的降低認為是凋亡細胞的標誌之一。
生物幫上面有詳細的介紹，shrna
設計原則
怎樣利用pi單染色法進行流式細胞儀檢測細胞凋亡
3樓：匿名使用者
pi 單染並不是很好的看凋亡的方法。一般可以作為早期的篩選實驗，因為特異性不好
方法和做細胞週期是一樣的，你可以查一下做細胞週期的實驗方法，我這裡就不貼了。
幾點注意：
一定要設定單細胞gate，以防多聚細胞核雜質的干擾rna酶不要忘記了
固定時間半小時足以，千萬不要在酒精中過夜，不然會產生大量碎片
pi染色流式細胞儀結果圖分析，只是看細胞凋亡，多謝
請問流式細胞儀檢測細胞凋亡的原理是什麼？
4樓：匿名使用者
一、原理
在正常細胞中，磷脂醯絲氨酸（ps）只分布在細胞膜脂質雙層的內側，而在細胞凋亡早期，細胞膜中的磷脂醯絲氨酸（ps）由脂膜內側翻向外側。annexin v是一種分子量為35~36kd的ca2+依賴性磷脂結合蛋白，與磷脂醯絲氨酸有高度親和力，故可通過細胞外側暴露的磷脂醯絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結合。因此annexin v被作為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標之一。
將annexin v進行熒光素（egfp、fitc）標記，以標記了的annexin v作為熒光探針，利用熒光顯微鏡或流式細胞儀可檢測細胞凋亡的發生。
碘化丙啶（propidium iodide, pi）是一種核酸染料，它不能透過完整的細胞膜，但對凋亡中晚期的細胞和死細胞，pi能夠透過細胞膜而使細胞核染紅。因此將annexin v與pi匹配使用，就可以將處於不同凋亡時期的細胞區分開來。
二、注意事項
1、必須活細胞檢測，不能用能破壞細胞膜完整性的固定劑和穿透劑固定或穿膜。
2、特殊細胞的染色方法：在消化或吹打時，有些細胞（如神經元細胞）很容易受到損傷，導致晚期凋亡或壞死比例非常高，不能反映真實結果。實驗的解決方法：
先低速離心，吸取細胞培養板中的液體，留少許液體，加入適量pi和annexin-v染色10min後，將漂浮細胞吸至離心管中，離心洗滌兩次，用pbs漂洗貼壁細胞兩次，加胰酶消化後將細胞懸液移至另一離心管中，離心洗滌，再與漂浮細胞合併後上流式細胞儀檢測。應用該法可降低晚期凋亡和壞死比例，增加早期凋亡細胞比例。
3、由於annexin-v為鈣離子依賴的磷脂結合蛋白，只有在鈣離子存在的情況下與ps的親和力才大，因而在消化細胞時，建議一般不採用含edta的消化液。
4、必須設定陰性對照和補償對照（分別單染）。
5樓：匿名使用者
最常用的是annexinv /pi雙染檢測凋亡，凋亡的細胞膜上的ps（磷脂醯絲氨酸蛋白）會從膜內轉移到膜外，我們利用annexinv抗體即可與之結合，有結和得說明這個細胞有凋亡，pi是用來區分死活細胞的，一般認為annexinv陽性，pi陰性的那群細胞即為早期凋亡細胞。
【求助】流式細胞儀檢測細胞凋亡結果該怎樣分析
6樓：憕
已經做完流
bai式，看到結果卻不知該怎du樣分析了zhi。我用的是annexinv-fitc 凋亡試劑盒 ，daoannexinv/pi雙染檢測細版胞凋亡。請教各位權，凋亡散點圖中第1，2，4象限到底分別代表什麼細胞？
手裡的資料說法都不相同。試劑盒說明書：1代表細胞收集過程中機械性損傷的細胞，2 代表繼發性壞死細胞，4代表凋亡細胞。
有資料說：1代表壞死細胞，2代表晚期凋亡細胞，4代表早期凋亡細胞。我就不明白了，既然是凋亡，就算是晚期，細胞膜也會破壞？
還有的認為，2象限代表晚期凋亡和繼發性壞死的細胞。
我用的是美國beckman-coulter公司試劑盒，它的說明說上就是這麼寫的：
quadrant 3：viable cellsquadrant 4：apoptotic cellsquadrant 2：secondary necrotic cells
這種說法在園子裡還沒見過。
應該以說明書為準嗎？我很迷茫。請您指點。
C利用公式PI 4 1 1 7計算PI的近似值
由於s與i都為整型，s i的結果會取整。將pi pi s i 改為pi pi s 1.0 i 並且輸出結果時將pi改為pi 4。更改制以下即可 pi pi double s i 否則s i是按整型取結果的 親測可用，呵呵，望採納。include void main printf 此數約為 2f 4 ...
神舟優雅A470P I3 D3怎樣
應該不錯，其實在筆記本上，i3和i5差不多，只要不睿頻，根本看不出區別。現在降價了，只要2999！當務之急是升級到4g記憶體，現在要支援獨立顯示卡必須裝64位的win7，而2g記憶體帶64位win7相當吃力，動不動記憶體佔用率就達到90 以上。hd6610顯示卡應該不錯，至少比gt520強很多，而且...
關於怎樣利用課餘時間的發言稿關於怎樣利用課餘時間的發言稿
現代科學認為，每個人的潛力 潛質相差無幾。一些科學家經過對人的大腦研究後證實，影響人的智商的腦細胞大體相當。那麼，為什麼有的人顯得聰明，有的人卻很愚鈍 有的人有所作為，有的人卻碌碌無為。人為何有差異呢?對此，大科學家愛因斯坦明確回答 人的差異在於業餘時間 我們總認為，人與人不同，這裡面有環境 有機緣...