1樓:匿名使用者
相關**分析其結構,功能域,檢測組織表達譜,再進行相應的推測。
2樓:匿名使用者
我想問下既然你不知道基因的功能,那你是怎麼樣克隆的啊~你要克隆一個基因首先是要知道它的如干序列,或者與它相似的基因,才能設計引物,那麼你的引物優勢怎麼樣設計的!
3樓:妹妹小魚兒
利用載體將克隆到的基因轉到人體細胞中,比如胚胎細胞、幹細胞等有**能力的細胞,在適宜環境中表達,研究其功能!但是涉及到技術問題和倫理問題哦!
克隆一個新基因,通常要對其編碼的蛋白質進行功能**,為什麼
4樓:向日葵露珠
克隆一個bai新基因,通常要對du其編碼的蛋白質zhi進行功能**,為什dao麼
一般的研究思路
內(針對真核細胞蛋白容
):1. 克隆後,在細胞內過量表達,看有啥變化2. 檢測不同細胞內的表達水平,設計rnai, 在表達水平高的細胞內阻斷該蛋白的產生。看有啥變化。
3. 至於在大腸桿菌中的表達,是要研究蛋白質本身的性質,比如結構等,再用到。
急用!一論述題:如何克隆一個功能性基因,如何在原核系統中高效表達? 50
5樓:我和家人
這題目考查的就是基因工程的步驟,詳細敘述下基因工程的步驟即可。
提取目的基因:主要有兩條途徑:如果目的基因序列已知,則用限制性內切酶從供體細胞的dna中直接分離基因;如果序列未知,則人工合成基因。
直接分離基因最常用的方法是「鳥槍法」,用限制酶將供體細胞中的dna切成許多片段,將這些片段分別載入運載體,然後通過運載體分別轉入不同的受體細胞,讓供體細胞提供的dna(即外源dna)的所有片段分別在各個受體細胞中大量複製(在遺傳學中叫做擴增),從中找出含有目的基因的細胞,再用一定的方法把帶有目的基因的dn**段分離出來;人工合成基因的方法主要有兩條:一條途徑是以目的基因轉錄成的信使rna為模版,反轉錄成互補的單鏈dna,然後在酶的作用下合成雙鏈dna,從而獲得所需要的基因。另一條途徑是根據已知的蛋白質的氨基酸序列,推測出相應的信使rna序列,然後按照鹼基互補配對的原則,推測出它的基因的核苷酸序列,再通過化學方法,以單鏈核苷酸為原料合成目的基因。
目的基因與運載體結合:這是基因工程的核心,三種最常用的載體是細菌質粒、噬菌體和動植物病毒。如果以質粒作為運載體,首先要用一定的限制酶切割質粒,使質粒出現一個缺口,露出黏性末端。
然後用同一種限制酶切斷目的基因,使其產生相同的黏性末端。將切下的目的基因的片段插入質粒的切口處,首先鹼基互補配對結合,兩個黏性末端吻合在一起,鹼基之間形成氫鍵,再加入適量dna連線酶,催化兩條dna鏈之間形成磷酸二酯鍵,從而將相鄰的脫氧核糖核酸連線起來,形成一個重組dna分子。
將目的基因匯入受體細胞:基因工程中常用的受體細胞有大腸桿菌,枯草桿菌,土壤農桿菌,酵母菌和動植物細胞等。題目為原核系統,如受體細胞是細菌,一般是將細菌用氯化鈣處理,以增大細菌細胞壁的通透性,使含有目的基因的重組質粒進入受體細胞。
目的基因匯入受體細胞後,就可以隨著受體細胞的繁殖而複製,由於細菌的繁殖速度非常快,在很短的時間內就能夠獲得大量的目的基因。
目的基因的檢測和表達:目的基因匯入受體細胞後,是否可以穩定維持和表達其遺傳特性,只有通過檢測與鑑定才能知道。檢測的方法有很多種,例如,大腸桿菌的某種質粒具有青黴素抗性基因,當這種質粒與外源dna組合在一起形成重組質粒,並被轉入受體細胞後,就可以根據受體細胞是否具有青黴素抗性來判斷受體細胞是否獲得了目的基因。
重組dna分子進入受體細胞後,受體細胞必須表現出特定的性狀,才能說明目的基因完成了表達過程。
6樓:匿名使用者
脅下心功1大心心情心兩個義務幣種兩
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