1樓:匿名使用者
1. 前處理。
把蛋白質從昌並原來的組織或溶解狀態釋放出來,保持原來的天然狀態,並不丟。
失生物活性。常用的方法:勻漿器破碎、超生波破碎、纖維素酶處理以及溶菌酶等。
超聲波破碎法:當聲波達到一定頻率時,使液體產生空穴效應使細胞破碎的技術。超聲波引起的快速振動使液體區域性產生低氣壓,這個低氣壓使液體轉化為氣體。
即形成很多小氣泡。由於區域性壓力的轉換,壓力重新公升高,氣泡崩潰。崩潰的氣泡產生乙個振動波並傳送到液體中,形成剪下力使細胞破碎。
2. 粗分級。
分離可用鹽析、等電點沉澱和有機溶劑分級分離等方法耐慶跡。這些方法的特點是簡便、處理量大,3. 細分級。
樣品的進一步純化。樣品經粗分離以後,一般體積較小,雜蛋白大部分已被除去。進一步純化,一般使用層析法包括凝膠過濾、離子交換層析、吸附層析以及親和層析等。
必要時還可選擇電泳差拆、等電聚焦等作為最後的純化步驟。
2樓:網友
不知道是什麼東西啊。
五種蛋白質-蛋白質相互作用的方法,簡述其中乙個原理。
3樓:匿名使用者
蛋白質分bai子的相互作用du
一、生物大分子。
的相zhi互作用:生物大分dao子發揮版生理功能所需權的三個條件:分子結構、分子運動和變化以及分子間的相互作用。
1、非共價鍵的左右:離子鍵、氫鍵、範德華力和疏水鍵。資訊的傳遞以及利用極大地以來弱的非共價鍵。
它們不僅決定著生物的大分子的三維結構,還決定著這些結構如何與其他結構相互作用。 2、作用力特點:分子的結合與解離。
二、蛋白質-蛋白質相互作用蛋白質之間相互作用的結構模式:通過蛋白質的模體或基元或者結構域而發生作用。
三、dna-蛋白質相互作用:兩者之間相互作用的化學鍵 1、氫鍵:具有識別功能蛋白質的螺旋結構常與dna的大溝相互作用。
2、疏水鍵:暴露於大溝側源的t-ch3集團是疏水性的,可與疏水氨基酸殘基側鏈相互作用。 3、離子鍵蛋白質也屬於生物大分子,存在氫鍵、範德華力和疏水鍵由於這幾種作用力的存在,使得蛋白質更加穩定。
4樓:翡翠皇蜂
一、酵母雙雜交系統。
原理:當靶蛋白和誘餌蛋白特異結合後,誘餌蛋白結合於報道基因的啟動子,啟動報道基因在酵母細胞內的表達,如果檢測到報道基因的表達產物,則說明兩者之間有相互作用,反之則兩者之間沒有相互作用。
二、噬茵體展示技術。
原理:在編碼噬菌體外殼蛋白基因上連線一單轉殖抗體的dna序列,當噬菌體生長時,表面就表達出相應的單抗,再將噬菌體過柱,柱上若含目的蛋白,就會與相應抗體特異性結合。
三、等離子共振技術。
原理:利用一種奈米級的薄膜吸附上「誘餌蛋白」,當待測蛋白與誘餌蛋白結合後,薄膜的共振性質會發生改變,通過檢測便可知這兩種蛋白的結合情況。
四、免疫共沉澱技術。
基本原理:在細胞裂解液中加入抗興趣蛋白的抗體,孵育後再加入與抗體特異結合的結合於pansobin珠上的金黃色葡萄球菌蛋白a(spa),若細胞中有正與興趣蛋白結合的目的蛋白,就可以形成這樣一種複合物:「目的蛋白—興趣蛋白—抗興趣蛋白抗體—spa|pansobin」,因為spa|pansobin比較大,這樣複合物在離心時就被分離出來。
經變性聚丙烯醯胺凝膠電泳,複合物四組分又被分開。然後經western blotting法,用抗體檢測目的蛋白是什麼,是否為**蛋白。
五、pull-down技術。
原理:用固相化的、已標記的餌蛋白或標籤蛋白(生物素-、polyhis-或gst-),從細胞裂解液中釣出與之相互作用的蛋白。
簡述組蛋白都有哪些型別的修飾,其功能分別是什麼,具有什麼生物學意義
5樓:句月聽風
組蛋白修飾是指組蛋白在相關酶作用下發生甲基化、乙醯化、磷酸化、腺苷酸化、泛素化、adp核糖基化等修飾的過程。這些修飾都會影響基因的轉錄活性。
一般甲基化與染色體的失活有關。乙醯化一般代表染色質的活性狀態,有的組蛋白要先去甲基化,再乙醯化活化。磷酸化(如h1的)一般與細胞週期的狀態有關,不能磷酸化,染色體不能進行復制。
某種蛋白質的結構片段如下:(1)上述蛋白質結構片段完全水解所生成的氨基酸是______.(2)水解所生成的
6樓:窩窩小夜
1)分子結構中含有的<>
斷碳氮單鍵,碳上加-oh,氮上加-h,水解得到的氨基酸為ch3ch(nh2
cooh、h2
nch2cooh、h2
nch2ch(sh)cooh、h2
nch(c6
h5cooh,故答案為:ch3
ch(nh2
cooh、h2
nch2cooh、h2
nch2ch(sh)cooh、h2
nch(c6
h5cooh;
2)h2nch(c6
h5cooh中c、h原子個數比最大,該氨基酸與naoh反應的化學方程式為<>
h2nch(c6
h5cooh兩分子縮合形成的環狀物質,反應為<>故答案為:<>
3)結構片段含4個<>
水解需要4個水分子生成氨基酸則水解生成的各種氨基酸的式量之和為364+18×4=436,故答案為:436.
試舉例說明蛋白質的生物學功能
7樓:車含煙郗乾
蛋白質的性質及生物學功能蛋白質是由許多氨基酸分子組成的,分子量很大。所以它有的性質與氨基酸相同,有的性質又與氨基酸不同,如膠體性質、變構作用和變性作用等。(1)膠體性質:
蛋白質分子量很大,容易在水中形成膠體粒,具有膠體性質。在水溶液中,蛋白質形成親水膠體,就是在膠體顆粒之外包含有一層水膜。水膜可以把各個顆粒相互隔開,所以顆粒不會凝聚成塊而下沉。
2)變構作用:含2個以上亞基的蛋白質分子,如果其中乙個亞基與小分子物質結合,那就不但該亞基的空間結構要發生變化,其他亞基的構象也將發生變化,結果整個蛋白質分子的構象乃至活性均將發生變化,這一現象稱為變構或別構作用。例如,某些酶分子可以和它所催化的最終產物結合,引起變構效應,使酶的活力降低,從而起到反饋抑制的效果。
3)變性作用:蛋白質在重金屬鹽(汞鹽、銀鹽、銅鹽等)、酸、鹼、乙醛、尿素等的存在下,或是加熱至70~100℃,或在x射線、紫外線的作用下,其空間結構發生改變和破壞,從而失去生物學活性,這種現象稱為變性。變性過程中不發生肽鍵斷裂和二硫鍵的破壞,因而不發生一級結構的破壞,而主要發生氫鍵、疏水鍵的破壞,使肽鏈的有序的捲曲、摺疊狀態變為鬆散無序。
種類繁多的蛋白質具有多種多樣的生物學功能,歸納起來主要具有下列5個方面:(1)作為酶,蛋白質具有催化功能。(2)作為結構成分,它規定和維持細胞的構造。
3)作為代謝的調節者(激素或阻遏物),它能協調和指導細胞內的化學過程。(4)作為運輸工具,它能在細胞內或者透過細胞膜傳遞小分子或離子。(5)作為抗體,它起著保護有機體,防禦外物入侵的作用。
蛋白質是一切生命現象不可缺少的,即使像病毒、類病毒那樣以核酸為主體的生物,也必須在它們寄生的活細胞的蛋白質的作用下,才能表現出生命現象。
簡述rRNA結構特點極其生物學功能
bai 3張 核糖體rna 即rrna,是du zhi最多的一類 daorna,也是3類rna trna,mrna,rrna 中相對分子 內質量最大的一類rna,它與蛋白質容結合而形成核糖體,其功能是作為mrna的支架,使mrna分子在其上,形成肽鏈 肽鏈在內質網 高爾基體作用下盤曲摺疊加工修飾成蛋...
免疫球蛋白具有哪些生物學功能,免疫球蛋白的生物學功能有哪些
免疫球蛋白又稱ig,在體內,抗體和抗原結合後可直接發揮效應,如抗毒素可中和外毒素,病毒的中和抗體可阻止病毒感染靶細胞,分泌型iga可抑制細菌黏附宿主細胞等。在體外,抗體與抗原結合後可出現凝集 沉澱等現象。免疫球蛋白能啟用補體,結合細胞表面的fc受體,fc即可結晶片段。用木瓜蛋白酶水解igg分子,可得...
試舉例說明蛋白質的生物學功能,試述蛋白質的生物學功能
蛋白質是由許多氨基酸分子組成的,分子量很大。所以它有的性質與氨基酸相同,有的性質又與氨基酸不同,如膠體性質 變構作用和變性作用等。1 膠體性質 蛋白質分子量很大,容易在水中形成膠體粒,具有膠體性質。在水溶液中,蛋白質形成親水膠體,就是在膠體顆粒之外包含有一層水膜。水膜可以把各個顆粒相互隔開,所以顆粒...