1樓：小月有愛
解決方案是加強保留，若不改變固定相，可向流動相中加入新增劑抑制被測物電離，最極端的就是離子對色譜。或更換色譜柱，使用hilic模式、可耐純水相的色譜柱、反相與離子交換的混合填料等。具體還是要看目標物結構。
其實反相分離還是可以解決很多問題的。注意流動相ph和樣品的溶液都要使目標物呈遊離態，有利於更好的保留。如果不介意，可以把樣品結構發給我，以及可能的雜質結構等。
單純的c18固定相往往不適合極性太強的分子，比如多糖、核酸。解決方案是加強保留，若不改變固定相，可向流動相中加入新增劑抑制被測物電離，最極端的就是離子對色譜。或更換色譜柱，使用hilic模式、可耐純水相的色譜柱、反相與離子交換的混合填料等。
如果是以純化為目的，還可考慮使用大孔樹脂。<>
2樓：猴61173脖頁
反相色譜法（reverse phase chromatography, rpc）是分離大多數常規樣品的首選分離模式，該模式一般比其他色譜模式的普適性更好，令人滿意的分離度也讓反相色譜法成為最廣泛應用的純化方法。然而反相色譜法對於親水性化合物卻不能很好的分離，使用普通的反相色譜柱，這類親水化合物都難以有效地保留。而hilic柱對於這類化合物不僅有合適的保留時間，還有令人滿意的分離度。
常州三泰科技公司的sepaflash® hilic柱與快速液相製備色譜系統sepabeantm machine結合有著優越的分離效能，本文比較了sepaflash® hilic柱與sepaflash® c18柱在反相模式下對於兩種強極性化合物的分離效果，實驗結果表明sepaflash® hilic柱有著優秀的分離效果，為此類化合物的分離純化提供了一套高效且實用的解決方案。
根據分離圖譜，我們能準確測得保留時間與峰寬，可用公式計算相應的分離度：
r = (t2 - t1) /w1/2)1 + w1/2)2式中t1與t2分別為相鄰譜峰的保留時間，(w1/2)1與(w1/2)2是半峰高處測得的峰1和峰2的峰寬。根據公式分別計算圖4和圖5中相鄰譜峰的分離度，sepaflash® c18柱中相鄰譜峰的分離度r≈，sepaflash® hilic柱中相鄰譜峰的分離度r≈。通過計算分離度可以看出，sepaflash® hilic柱的分離度要遠遠超過sepaflash® c18柱。
實驗結果表明，sepaflash® hilic柱表現出了卓越的選擇性，成功地保留和分離了胞嘧啶和維生素c的混合物。根據分離圖譜可以看出，即使在sepaflash® c18反相柱上以高達95%的水溶液流動相來分離，這兩種強極性化合物也只有很弱的保留，並且混合物樣品沒有得到基線分離。對比c18反相柱的分離結果，我們可以看到混合物樣品在sepaflash® hilic柱上不僅有合適的保留時間，而且有理想的分離度。
因此，本文中的方法為強極性化合物的快速分離純化提供了一套高效且實用的解決方案。<>
3樓：支尋槐
反相色譜的分離範圍是相當寬的，很多水溶性的物質，例如丙烯酸，聚乙二醇。
衍生物，小分子的糖苷等，都是可以用反相色譜來分離的。至於你的目標物親水性到底有多強，這個是不好界定的。像葡萄糖。
這類，目前還沒法用反相色譜測。但是對於很多水溶性的藥物，目前有不少改進的反相填料，對強極性物質的保留能力有顯著的改善。就我知道的比較典型的藥物是利巴韋林。
有專用的反相填料針對這種親水性的藥物。而對於一些有機酸和有機鹼，調節ph是常見的改善分離的方法。如果還不夠理想，可以通過離子對試劑來增強保留。<>
何謂正相色譜和反相色譜？在應用上有什麼特點
4樓：雨說情感
1、正相色譜基本上可以被看做是液固吸附色譜，其柱填料是吸附劑，其表面上分佈有活性吸附位點，溶劑和溶質分子均能被吸附於活性位點上。由於相互作用力有大有小，溶劑分子與溶質分子、溶質分子相互之間又存在競爭吸附，從而造成了在柱內保留時間的差異，使不同物質得到分離。
應用特點：正相色譜一般用來分離中性化合物和離子(或可電離的)化合物，而且以中性樣品為主。適於分離樣品如下：
對於反相色譜法很難分離的異構體，可以採用以矽膠為固定相的正相色譜分離分析；
根據被分離樣品極性差別進行族類分離；
易於水解樣品的分離分析；
分離分析高脂溶性樣品，其在極性有機溶劑中溶解度很小；
正相色譜也可以用於異構體分離(包括幾何異構體和光學異構體)。
2、流動相極性大於固定相極性的情況，稱為反相色譜。非極性鍵合相色譜可作反相色譜。在現代液相色譜中應用最廣泛，現代液相色譜分析工作的70%以上是在非極性鍵合固定相上進行的。
反相介質效能穩定。分離效率高，可分離蛋白質、肽、氨基酸、核酸等含有非極性基團的各種物質。
應用特點：反相介質效能穩定。分離效率高，可分離蛋白質、肽、氨基酸、核酸、甾類、脂類、脂肪酸、糖類、植物鹼等含有非極性基團的各種物質。
5樓：網友
根據流動相極性的強弱來區分。
反相還是正相，是根據流動相相對於固定相的極性而言的。流動相極性強於固定相的，稱作反相色譜，流動相極性弱於固定相的，稱作正相色譜。
反相色譜流動相的極性強，容易帶著極性分子走，而留下非極性分子。這主要用於非極性樣品的分離，常用的高壓液相色譜都是這種。也有人喜歡說反相液相色譜，其實是乙個意思。
就是顯得博學一點。
反相色譜主要是以水等極性物質作為流動相，按相似相容原理，出峰先後是從極性強的到極性弱的，而正相色譜的流動相大多為非極性物質。出峰先後則是從弱極性的到強極性的。
最直觀的是看固定相和流動相的極性差異，另外也要看你想要實現拆分的物質極性與固定相和流動相的極性差異。在忽略掉空間結構的前提下，主要依靠極性大小導致相互作用能差，進而實現有效拆分。
如何選擇反相鍵合相色譜法的固定相
6樓：網友
鍵合相色譜法是由液－液色譜法即分配色譜發展起來的。鍵合相色譜法將固定相共價結合在載體顆粒上，克服了分配色譜中由於固定相在流動中有微量溶解，及流動相通過色譜柱時的機械衝擊，固定相不斷損失，色譜柱的性質逐漸改變等缺點。鍵合相色譜法可分為正常相色譜法和反相色譜法。
反相色譜法。
在反相色譜法中共價結合到載體上的固定相是一些直鏈碳氫化合物，如正辛基等。流動相的極性比固定相的極性強。反相色譜法在高效液相色譜法中應用最廣泛。
在反相色譜法中，使溶質滯留的主要作用是疏水作用，在高效液相色譜中又被稱為疏溶劑作用。所謂疏水作用即當水中存在非極性溶質時，溶質分子之間的相互作用 、溶質分子與水分子之間的相互作用遠小於水分子之間的相互作用， 因此溶質分子從水中被「擠」了出去。可見反相色譜中疏水性越強的化合物越容易從流動相中擠出去，在色譜柱中滯留時間也長，所以反相色譜法中不同的化合物根據鬧世頃它們的疏水特性得到分離。
反相色譜法適於分離帶有不同疏水基團的化合物，亦即非極性基團的化合物。此外，反相色譜法可用於分離帶有不同極性基團的化合物。可以通過改變流動相的溶劑及其組成和ph，以影響溶質分子與流動相的相互作用，改變它們的滯留行為。
另外，反相色譜中水的流動相中佔的比例伸縮性很大，可以/從0-100%，從而使反相色譜可用於液陸水溶性、脂溶性化合物的分離。反相色譜法中的固定相是被共價結合到矽膠載體上的直鏈飽和和烷烴，其鏈的長短不同，最長的是十八烷基，這也是使用得最多的固定相。直鏈飽和烷烴疏水特性隨著碳氫鏈的長度而增加，在反相色譜柱中溶質由於疏水作用而滯留的時間也將隨著碳氫鏈返禪的長度而增加。
在一般情況下這意味著用碳氫鏈長的反相色譜柱能得到較好的分辯率，在多數情況下是依靠反覆來選擇色譜柱。由於反相色譜法的固定相是疏水的碳氫化合物，溶質與固定相之間的作用主要是非極性相互作用，或者說疏水相互作用，因此溶劑的強度隨著極性降低而增加。水是極性最強的溶劑，也是反相色譜中最弱的溶劑。
在反相色譜中常常用和基礎溶劑，向其中加入不同濃度的、可以與水混溶的有機溶劑，以得到不同強度的流動相，這些有機溶劑稱為修飾劑。反相色譜中最常用的有機溶劑有甲醇和乙腈，此外，乙醇、四氫呋喃、異丙醇及二氧六環也常被用作修飾劑。
四大色譜原理是什麼？
7樓：網友
1 高效液相色譜儀的系統組成、工作原理。
8樓：袁語蝶翠衛
混合物的分離是基於組分的物理化學性質的差異，gc主要是利用物質的沸點、極性及吸附性質的差異來實現混合物的分離。待分析樣品在汽化室汽化後被惰性氣體（即載氣，一般是n2、he等）帶入色譜柱，柱內含有液體或固體固定相，由於樣品中各組分的沸點、極性或吸附效能不同，每種組分都傾向於在流動相和固定相之間形成分配或吸附平衡。但由於載氣是流動的，這種平衡實際上很難建立起來，也正是由於載氣的流動，使樣品組分在運動中進行反覆多次的分配或吸附/解附，結果在載氣中分配濃度大的組分先流出色譜柱，而在固定相中分配濃度小的組分後流出。
當組分流出色譜柱後，立即進入檢測器，檢測器能夠將樣品組分的存在與否轉變為電訊號，而電訊號的大小與被測組分的量或濃度成比例，當將這些訊號放大並記錄下來時，它包含了色譜的全部原始資訊。在沒有組分流出時，色譜圖的記錄是檢測器的本底訊號，即色譜圖的基線。
9樓：壬文惠閎富
氣相色譜法（gas
chromatography
簡稱gc）是色譜法的一種。色譜法中有兩個相，乙個相是流動相，另乙個相是固定相。如果用液體作流動相，就叫液相色譜，用氣體作流動相，就叫氣相色譜。
氣相色譜法由於所用的固定相不同，可以分為兩種，用固體吸附劑作固定相的叫氣固色譜，用塗有固定液的單體作固定相的叫氣液色譜。
按色譜分離原理來分，氣相色譜法亦可分為吸附色譜和分配色譜兩類，在氣固色譜中，固定相為吸附劑，氣固色譜屬於吸附色譜，氣液色譜屬於分配色譜。
按色譜操作形式來分，氣相色譜屬於柱色譜，根據所使用的色譜柱粗細不同，可分為一般填充柱和毛細管柱兩類。一般填充柱是將固定相裝在一根玻璃或金屬的管中，管內徑為2～6公釐。毛細管柱則又可分為空心毛細管柱和填充毛細管柱兩種。
空心毛細管柱是將固定液直接塗在內徑只有公釐的玻璃或金屬毛細管的內壁上，填充毛細管柱是近幾年才發展起來的，它是將某些多孔性固體顆粒裝入厚壁玻管中，然後加熱拉制成毛細管，一般內徑為公釐。
在實際工作中，氣相色譜法是以氣液色譜為主。
氣相色譜工作原理：
利用試樣中各組份在氣相和固定液液相間的分配係數不同，當汽化後的試樣被載氣帶入色譜柱中執行時，組份就在其中的兩相間進行反覆多次分配，由於固定相對各組份的吸附或溶解能力不同，因此各組份在色譜柱中的執行速度就不同，經過一定的柱長後，便彼此分離，按順序離開色譜柱進入檢測器，產生的離子流訊號經放大後，在記錄器上描繪出各組份的色譜峰。
排阻色譜法的原理，分子排阻色譜法的分離機理
排阻色譜的分離機理是立體排阻，樣品組分與固定相之間不存在相互作用的現象。色譜柱。的填料是凝膠，它是一種表面惰性，含有許多不同尺寸的孔穴或立體網狀物質。凝膠的孔穴大小與被分離的試樣大小相當。僅允許直徑小於孔開度的組分分子進入，這些孔對於流動相分子來說是相當大的，以致流動相分子可以自由地擴散出人。對不同...
氣相色譜法中歸一化定量為什麼要用校正因子
由於同一檢測器對不同物質的響應值不同，所以當相同質量的不同物質通過檢測器時，產生的峰面積 或峰高 不一定相等。為使峰面積能夠準確地反映待測組分的含量，就必須先用已知量的待測組分測定在所用色譜條件下的峰面積，以計算定量校正因子。相對校正因子就是當組分i的質量與標準物質s相等時，標準物質的峰面積是組分i...
氣相色譜法分析一氧化氮的具體步驟是怎麼樣的？哪位高手能幫我建立分析方法，最好能具體點的，包括用
樓主先把你的問題的背景詳細介紹一下吧！這樣大家才好幫你解決問題。朋友可以到行業內專內業的 請各位高手幫我分析一下這幾句子，謝謝 重獎 1 翻譯 雖然這本該是專門聚焦於在外交政策的問題的討論，這次完版全地削弱了此權討論的嚴重的金融危機成為在這前半場討論中提出的最高爭論點 事件 2 你的分析1 2 3 ...