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排阻色譜的分離機理是立體排阻,樣品組分與固定相之間不存在相互作用的現象。色譜柱。
的填料是凝膠,它是一種表面惰性,含有許多不同尺寸的孔穴或立體網狀物質。凝膠的孔穴大小與被分離的試樣大小相當。僅允許直徑小於孔開度的組分分子進入,這些孔對於流動相分子來說是相當大的,以致流動相分子可以自由地擴散出人。
對不同大小的組分分子,可分別滲入到凝膠孔內的不同深度,大個的組分分子可以滲入到凝膠的大孔內,但進不了小孔,甚至於完全被排斥。小個的組分分子,大孔小孔都可以滲進去,甚至進入很深,一時不易洗脫出來。因此,大的組分分子在色譜柱中停留時間較短,很快被洗出,它的洗脫體積(即保留時間)很小。
小的組分分子在色譜柱中停留時間較長,洗脫體積卿保留時間)較大,直到所有孔內的最小分子到達柱出口,這種按分子大小而分離的洗脫過程才告完成。 因為分子尺寸一般隨分子量的增加而增大,所以根據分子量表達分子尺寸比較方便。將因分子過大而不能部分地進入某一給走固定相孔內的最小的樣品粒子的分子量,定義為該固定相的排阻極限。
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體積大的分子不能滲透到凝膠孔穴中去而被排阻,較早的淋洗出來;中等體積的分子部分滲透;小分子可完全滲透入內,最後洗出色譜柱。樣品分子基本按其分子大小先後排阻,從柱中流出。被廣泛應用於大分子分級,即用來分析大分子物質相對分子質量的分佈。
分子排阻色譜法的分離機理
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樣品分子與固定相之間不存在相互作用,色譜固定相是多孔性凝膠,僅允許直徑小於孔徑的組分進入,這些孔對於溶劑分子來說是相當大的,以致溶劑分子可以自由的擴散出入。
樣品中的大分子不能進入凝膠孔洞而完全被排阻,只能沿多孔凝膠粒子之間的空隙通過色譜柱,首先從柱中被流動相洗脫出來;中等大小的分子能進入凝膠中一些適當的孔洞中,但不能進入更小的微孔,在柱中受到滯留,較慢地從色譜柱洗脫出來;
小分子可進入凝膠中絕大部分孔洞,在柱中受到更強的滯留,會更慢的被洗脫出;溶解樣品的溶劑分子,其分子量最小,可進入凝膠的所有孔洞,最後從柱中流出,從而實現具有不同分子大小樣品的完全分離。
空間排阻色譜法的詳解
4樓:掌銳意
空間排阻色譜法以凝膠(gel)為固定相。它類似於分子篩的作用,但凝膠的孔徑比分子篩要大得多,一般為數奈米到數百奈米。溶質在兩相之間不是靠其相互作用力的不同來進行分離,而是按分子大小進行分離。
分離只與凝膠的孔徑分佈和溶質的流動力學體積或分子大小有關。試樣進入色譜柱後,隨流動相在凝膠外部間隙以及孔穴旁流過。在試樣中一些太大的分子不能進入膠孔而受到排阻,因此就直接通過柱子,首先在色譜圖上出現,一些很小的分子可以進入所有膠孔並滲透到顆粒中,這些組分在柱上的保留值最大,在色譜圖上最後出現。
高效液相色譜儀主要有進樣系統、輸液系統、分離系統、檢測系統和資料處理系統,下面將分別敘述其各自的組成與特點。
分子排阻色譜法的適用範圍
5樓:彼岸之戀
適用範圍:適用於對未知樣品的探索分離,它能很快提供樣品按分子大小組成的全面情況,並迅速判斷樣品是簡單的還是複雜的混合合物,並提供樣品中各組分的近似分子量。這種分離方法不宜用於分子大小組成相似或分子大小僅差10%的組分分析,如同分異構體的分離不宜用分子排阻色譜法。
分子排阻色譜法的介紹
6樓:眾神風逝
分子排阻色譜法又稱空間排阻色譜法(sec)是利用多孔凝膠固定相的獨特性產生的一種,主要根據凝膠孔隙的孔徑大小與高分子樣品分子的線團尺寸間的相對關係而對溶質進行分離的分析的方法。分子排阻色譜又叫凝膠色譜法。
分子排阻色譜法的分離原理是
7樓:考試資料網
答案】:e分子排阻談爛乎色譜法的分離原理是凝膠色譜柱的分子篩機制。分子排阻色譜法是根據含悉歷態待測組分的分子大小進行分離的一種液相色譜基數。
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