1樓：網友
不論是dna、rna還是蛋白，漂亮的電泳條帶的基礎是樣品質量要好。
1. rna：rna提取過程中不發生降解的話，一般普通的瓊脂糖電泳會得到3條清晰地條帶，上面兩條比較亮，且第一條是第二條亮度的2倍，第三條比較淡。
如果樣品稍有降解，也會看到3條帶，但最後一條較量，前兩條亮度相當或第二條比第一條稍亮。
如果叢物還想使圖譜更漂亮，可以跑變性膠電泳。比如甲醛變性瓊脂糖或尿素變性page。
2. dna：一般dna提取後直接電泳，滲寬液在最上部有清晰的dna條帶，無無拖尾，巧跡且點樣孔無亮斑。
一般我們檢測dna都是檢測pcr過後的產物。這時要想獲得清晰地圖譜要考慮以下幾個因素：dna質量、引物、pcr體系及反應條件。
這些因素需要你在實驗過程中慢慢摸索。還有一點就是要用新配製的膠且膠的濃度要合適。有時候，實驗要求不同，有引物二聚體或非特異性擴增對結果沒有什麼影響，且有時候這些無法避免。
如果引物或反應條件合適的話，你的電泳圖譜上你的目的條帶應該是最清楚最亮的，並且非目的條帶沒有或很少，且引物二聚體較淡，這樣整體看起來，電泳圖譜還是會很清晰地。
3. 蛋白：不好意思，我沒做過蛋白的實驗，不知道應該注意哪些，但我想樣品質量還是同樣重要的。
這只是自己的一點感受，希望能幫到你。
2樓：嗯a逄逄
你的樣品無降解，瓊脂糖的質量要好，電壓和時間除錯好。
如何電泳估計dna濃度
3樓：江淮一楠
一般用nanodrop測，1μl就可以了。如果沒有，跑膠可以估測。可以比較條帶與marker中分子量比較接近的條帶的灰度，再根據marker的量計算出大致的濃度。
做連線用不了多少dna的。根據你說的情況，我覺得你的樣品濃度分別大概在30和15左右。
一般都是用nanodrop測定dna和rna的濃度，用量只需要1ul
沒有嚴格要求的話一般不用測濃度，2號樣取1ul做連線就可以了。
一般用nanodrop測，1μl就可以了。如果沒有，跑膠可以估測。可以比較條帶與marker中分子量比較接近的條帶的灰度，再根據marker的量計算出大致的濃度。
做連線用不了多少dna的。根據你說的情況，我覺得你的樣品濃度分 ..
連線時用跑膠的方法估算濃度就可以，也不必太準確。你的結果，可估算載體約10ng，片段1約50ng，片段2約30-40ng，連線時載體取2-3ul，其餘加片段就可以了。載體不必太多，太多反而會產生太多自連線的，片段儘量多加吧。
我做連線轉化成功率可是特別高的。
質粒濃度低就全加吧，目的基因相應的也多加一點。我之前做過一次，濃度比這還低，條帶猛一看就看不出來，純粹是練手的心態繼續往下做，最後竟然轉化成功了。就算做不出來重頭再來嘛。
rna放在電泳的哪個端
4樓：
摘要。在電泳實驗中，rna放在電泳管的負端（cathode）。電泳是一種用於分離和分析大分子生物分子（如dna、rna和蛋白質）的技術。
它利用電流在電解質溶液中流動時分離分子的原理。在電泳實驗中，電流從正極（anode）流向負極（cathode）。rna分子被放置在負極，並通過電流的作用在電泳管中移動。
在電泳實驗中，rna放在電泳管的負端舉亮（cathode）。電泳是一種用於分離和分析大分子生物分子（如dna、rna和蛋白質）的技術。它利用電流在電解質溶液中流動時分離分子的原理。
在電泳正搏寬實驗中，電銀跡流從正極（anode）流向負極（cathode）。rna分子被放置在負極，並通過電流的作用在電泳管中移動。
rna分子的移動速度與其大小和電荷有關，因此可以通過電泳來分離不同大小的rna分子。
dna電泳圖怎麼會跑成這個樣子
5樓：北京索萊寶科技****
沒有上圖，不知道你的電泳圖具體是什麼樣自的，給你提供以下幾點注意事項，自己跑的時候可以注意一下：
1、凝膠一定要加熱熔解完全，均勻，可以對著光亮的地方看看是否清澈；
2、一般情況下，梳子越薄而長，條帶越好看；
3、上樣量不宜過多，會造成條帶的相互擠壓；
4、如果點樣孔多餘，儘量將樣點到中間，儘量避免邊緣效應，如果電泳槽夠大，將膠放在中間一些，電場比較均勻；
5、電泳電壓一般在7-10v/cm之間；
6、做膠的緩衝液和跑膠的緩衝液濃度應該一致；
7、膠的濃度可能也會有一點點影響，一般用或者。
8、加樣時不要太快，讓其自然沉底，均勻分佈在電泳孔內。
9、電泳開始時可以採用低電壓使其跑出孔後，再調高電壓。
dna電泳這是什麼情況
6樓：匿名使用者
dna電泳常見問題分析問題 原因 解決辦法 dna帶模糊 1) dna降解 避免核酸酶汙染 2) 電泳緩衝液陳舊 電泳緩衝液多次使用後，離子強度降低，ph值上公升，緩衝能力減弱，從而影響電泳效果。建議經常更換電泳緩衝液 3) 所用電泳條件不合適 電泳時電壓不應超過20v/cm，溫度＜30℃；巨大dna鏈電泳，溫度應＜15℃；核查所用電泳緩衝液是否有足夠的緩衝能力 4) dna上樣量過多 減少凝膠中dna上樣量 5) dna樣含鹽過高 電泳前通過乙醇沉澱去除過多的鹽 6) 有蛋白汙染 電泳前酚抽提去除蛋白 7) dna變性 電泳前勿加熱，用20mm nacl緩衝液稀釋dna 不規則dna帶遷移 1) 對於λ/hind iii片段cos位點復性 電泳前於65℃加熱dna 5分鐘，然後在冰上冷卻5分鐘 2) 電泳條件不合適 電泳電壓不超過20v/cm；溫度＜30℃；經常更換電泳緩衝液 3) dna變性 以20mm nacl buffer稀釋dna，電泳前勿加熱帶弱或無dna帶 1) dna的上樣量不夠 增加dna的上樣量；聚丙烯醯胺凝膠電泳比瓊脂糖電泳靈敏度稍高，上樣量可適當降低 2) dna降解 避免dna的核酸酶汙染 3) dna走出凝膠 縮短電泳時間，降低電壓，增強凝膠濃度 4) 對於eb染色的dna，所用光源不合適 應用短波長（254nm）的紫外光源 dna帶缺失 1) 小dna帶走出凝膠 縮短電泳時間，降低電壓，增強凝膠濃度 2) 分子大小相近的dna帶不易分辨 增加電泳時間，核准正確的凝膠濃度 3) dna 變性 電泳前請勿高溫加熱dna鏈，以20mm nacl buffer稀釋dna 4) dna鏈巨大，常規凝膠電泳不合適 在脈衝凝膠電泳上分析。
dna電泳常見問題分析
7樓：偶源宰父馨蘭
問題。原因。
解決辦法。dna帶模糊。
dna降解。
避免核酸酶汙染。
電泳緩衝液陳舊。
電泳緩衝液多次使用後，離子強度降低，ph值上公升，緩衝能力減弱，從而影響電泳效果。建議經常更換電泳緩衝液。
所用電泳條件不合適。
電泳時電壓不應超過20v/cm，溫度＜30℃;巨大dna鏈電泳，溫度應＜15℃;核查所用電泳緩衝液是否有足夠的緩衝能力。
dna上樣量過多。
減少凝搭帶螞膠中dna上樣量。
dna樣含鹽過高。
電泳前通過乙醇沉澱去除過多的鹽。
有蛋白汙染。
電泳前酚抽提去除蛋白。
dna變性。
電泳前勿加熱，用20mm
nacl緩衝液稀釋dna
不規則dna帶遷移。
對於λ/hind
iii片段cos位點復性。
電泳前於65℃加熱dna
5分鐘，然後在冰上冷卻5分鐘。
電泳條件不合適。
電泳電壓不超過20v/cm;溫度＜30℃;經常更換電泳緩衝液。
dna變性。
以20mmnacl
buffer稀釋dna，電泳前勿加熱。
帶弱或無dna帶。
dna的上樣量不夠。
增加dna的上樣量；聚丙烯醯胺凝膠電泳比瓊脂糖電泳靈敏度稍高，上樣量可適當降低。
dna降解。
避免dna的核酸酶汙染。
dna走出凝膠。
縮短電泳時間，降低電壓，增強凝膠知埋濃度行核。
對於eb染色的dna，所用光源不合適。
應用短波長(254nm)的紫外光源。
dna帶缺失。
小dna帶走出凝膠。
縮短電泳時間，降低電壓，增強凝膠濃度。
分子大小相近的dna帶不易分辨。
增加電泳時間，核准正確的凝膠濃度。
dna變性。
電泳前請勿高溫加熱dna鏈，以20mm
naclbuffer稀釋dna
dna鏈巨大，常規凝膠電泳不合適。
在脈衝凝膠電泳上分析。
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