1樓:匿名使用者
一種是脂質體轉染後,單克隆篩選穩定細胞株。另外一種是應用逆轉錄病毒,慢病毒轉染,篩選穩定細胞株。
pf用帶目標基因的質粒(pegfp-n1)轉染hepg2細胞,用g418篩選穩定表達株10天,gfp表達減弱減少。
2樓:匿名使用者
只要沒有整合到基因組dna,轉染進入的外源性dna都會隨著細胞**而被稀釋。所以經過10天后表達肯定是會減弱的,這是正常現象。只有當外援dna整合到基因組後,表達水平才能穩定
3樓:阿魯巴星人
g418濃度會不會過高(細胞數量少了,乍一看熒光也會很低)
如何讓一個細胞過度表達某種基因,來觀察此基因的作用,瞬時轉染和穩定轉染都用什麼方法
4樓:百替生物
瞬轉的方法有多種:磷酸鈣轉染法,pei轉染法,lipofectamine2000試劑盒轉染。**遞增。
一般容易轉染的細胞用前兩種方法。而比較難轉染的腫瘤細胞等則用lipo2000轉染。但用pei和lipo對細胞產生的毒性比用磷酸鈣法大。
穩轉一般都通過抗性篩選,前面已經回答過了,就不贅述了。
這些轉染都是使細胞通過多個質粒。
過表達一般通過western blot來檢測。過表達後蛋白表達量比原始細胞有顯著升高則說明過表達成功。
百替生物為您提供整體科研技術服務。
如何構建重組熒光質粒轉染後穩定表達的細胞系
5樓:匿名使用者
這個要看細胞的狀態和蛋白表達特點。推薦瞭解「主細胞庫」「工作細胞庫」這兩個名詞。
細胞全能性的表達需要什麼條件,細胞全能性表達的條件
離體,無菌,營養物質,激素 生長素 細胞 素 和適宜的外界條件 適宜的溫度 ph 一定的光照 植物細胞的全能性 bai表du達需要的條件 固體培養基 zhi裡面含有植物dao生長和發育所需要回的全部營養物質答,比如 礦質元素 維生素 植物激素 有機物 適宜的外界條件 如 適宜的溫度 ph值 一定的光...
生物體內的細胞由於細胞分化全能性不表達為什麼對
確實有,bai 但是在生物體內du,高度分化的細胞是zhi不會再表現出dao全能性的了,專因為這些細屬胞要完成各自特定的功能,不可以再分化成別的 而且,一般我們的結論是這樣的 植物細胞具有全能性,高度分化的動物細胞的細胞核仍具有全能性 有全能性這種能力,但是不一定非要表現出來,表現出來是要有前提條件...
對基因表達載體構建的一些說法，不正確的是A需要限制
a 構建基因表達載體需要限制酶切割 目的基因和運載體，用dna連線酶處理基因相回同黏性末端的目的答基因和運載體進而形成重組dna，a正確 b 基因表達載體含有啟動子 終止子 標記基因和目的基因，b錯誤 c 通常用抗生素基因作為標記基因，便於目的基因的鑑定和篩選，c正確 d 基因表達載體的構建是基因工...