1樓：匿名使用者
最大的區別就是 gst pull-down技術是利用谷胱甘肽介質和gst融合標籤蛋白質之間相互作用結合的。 免疫共沉澱技術是利用了protein a或者g介質和igg之間相互作用結合的。 這是兩組不同的配基與蛋白吸附
免疫共沉澱中proteina/g的工作原理？western blot中封閉原理
2樓：匿名使用者
不知道你所說的proteina / protein g 是偶聯了beads的嗎？
如果是：用來結合抗體的。
如果不是：一般用來在加入抗體之前的封閉，當然也可以用來結合抗體的。
3樓：匿名使用者
我說下個人理解，我認為加入proteina/g是一方面與抗體結合，另一部位與瓊脂糖珠子結合，便於後續分離，至於問題2我就不清楚了
chip實驗中該用proteina還是proteing
4樓：生化狙擊者
染色體免疫共沉澱（chromatin immunoprecipitation，chip）是基於體內分析發展起來的方法，也稱結合位點分析法，在過去十年已經成為表觀遺傳資訊研究的主要方法。這項技術幫助研究者判斷在細胞核中基因組的某一特定位置會出現何種組蛋白修飾。chip不僅可以檢測體內反式因子與dna的動態作用，還可以用來研究組蛋白的各種共價修飾與基因表達的關係。
近年來，這種技術得到不斷的發展和完善。採用結合微陣列技術在染色體基因表達調控區域檢查染色體活性，是深入分析癌症、心血管疾病以及**神經系統紊亂等疾病的主要代謝通路的一種非常有效的工具。
它的原理是在保持組蛋白和dna聯合的同時，通過運用對應於一個特定組蛋白標記的生物抗體，染色質被切成很小的片斷，並沉澱下來。ip是利用抗原蛋白質和抗體的特異性結合以及細菌蛋白質的「prorein a」特異性地結合到免疫球蛋白的fc片段的現象活用開發出來的方法。目前多用精製的prorein a預先結合固化在argarose的beads上，使之與含有抗原的溶液及抗體反應後，beads上的prorein a就能吸附抗原達到精製的目的。
實驗最需要注意點就是抗體的性質。抗體不同和抗原結合能力也不同，免染能結合未必能用在ip反應。建議仔細檢查抗體的說明書。
特別是多抗的特異性是問題。其次，要注意溶解抗原的緩衝液的性質。多數的抗原是細胞構成的蛋白，特別是骨架蛋白，緩衝液必須要使其溶解。
為此，必須使用含有強介面活性劑的緩衝液，儘管它有可能影響一部分抗原抗體的結合。另一面，如用弱介面活性劑溶解細胞，就不能充分溶解細胞蛋白。即便溶解也產生與其它的蛋白結合的結果，抗原決定族被封閉，影響與抗體的結合，即使ip成功，也是很多蛋白與抗體共沉的悲慘結果。
再次，為防止蛋白的分解，修飾，溶解抗原的緩衝液必須加蛋白每抑制劑，低溫下進行實驗。每次實驗之前，首先考慮抗體/緩衝液的比例。抗體過少就不能檢出抗原，過多則就不能沉降在beads上，殘存在上清。
緩衝劑太少則不能溶解抗原，過多則抗原被稀釋。
5樓：匿名使用者
請問高手，免疫共沉澱中protein a 瓊脂糖珠的作用原理？謝謝
6樓：笑起來露16顆牙
prorein a或者 protein g能特異性地結合到免疫球蛋白的fc片段，所以能和抗體結合，抗體和你的目標蛋白結合，目標蛋白和相互作用的蛋白結合。
7樓：匿名使用者
protein a 可以特異性的和igg結合。
免疫共沉澱中igg有什麼用 詳細解釋 謝謝
8樓：小學生
是抗體，用來與你感興趣的蛋白結合，同時可以與包被有proteina/g結合，形成一個複合物。在離心或磁場的作用下，包被有proteina/g的小珠（如凝膠珠或磁珠）被分離出來，連帶著你感興趣蛋白被分離出來，如果你感興趣的蛋白與其它蛋白有穩定的結合的話，也將被分離，通過鑑定這些連帶被分離出來的蛋白，可以知道，哪些蛋白可能在機體內與你感興趣的蛋白有相互作用。
免疫沉澱結合western blot和免疫共沉澱研究蛋白互作的區別
9樓：匿名使用者
不知道你所說的proteina / protein g 是偶聯了beads的嗎? 如果是：用來結合抗體的.
如果不是：一般用來在加入抗體之前的封閉,當然也可以用來結合抗體的.
做免疫共沉澱，請問是買protein a sepharose 還是agarose
10樓：匿名使用者
sepharose和agarose是一個意思
都是以瓊脂糖為介質來偶聯protein a形成的親和配基，用來結合遊離的igg
不同的公司會有不一樣的商品名，但本質都是一樣的
請教gst pull-down assay和免疫共沉澱的區別
11樓：飛鴻love巨集
gst pull-down一般指用一個帶gst標籤的重組蛋白，與目的蛋白進行孵育，最後用結合gst的beads拉下相互作用複合物。
免疫共沉澱一般是用某一蛋白的抗體，在細胞裂解液中與相應的蛋白結果，用protein a/g將抗原抗體複合物拉下，最後在拉下的複合物中檢測目的蛋白的實驗。
二者都是用於檢測蛋白相互作用的實驗。
區別是pull-down一般是驗證 體外 相互作用；免疫共沉澱一般用於檢測細胞水平的 體內 相互作用。
12樓：cofe_飛
兩者原理和操作上都有一定的區別，比如做gst pull down的蛋白要有標籤，但是做免疫共沉澱就用不到，但是做免疫共沉澱需要額外準備抗體。（當然gst蛋白也需要準備抗體，畢竟事後要做wb的）
另外兩者都可以測兩種已知蛋白是否有相互作用或利用已知蛋白去調未知蛋白。本質上沒什麼區別，根據自己的情況選擇吧。
最後一點要說的就是，co-ip比較好的一點，就是可以模擬體內互作的情況，結果更真實一點。
免疫共沉澱中的input control是什麼意思
input control是是對照的一種，在細胞裂完離心之後 加入抗體ip之前吸出來的細胞裂解液。可以在wb 時顯示目的條帶的位置以及比較不同泳道之間用於ip反應的細胞蛋白量。比如有兩組，一個對照一個給藥，收了細胞以後裂解細胞做ip，會發現a和b的結合改變了。在得出這個結論之前要保證兩組的ip體系里...
我現在要做免疫共沉澱檢測蛋白質與蛋白質之間的相互作用，我是個新手，從來沒做過，我看過一些文獻，文獻
這個過程簡單講就是這麼幾步 抽蛋白掛抗體到beads上，做成有親和力的柱子 其實所謂 柱子 就是帶有抗體的beads裝到ep管裡 抽出來的蛋白去和柱子孵育，抗體識別的蛋白和與此蛋白互做的蛋白就掛到柱子上了 洗滌，將抗體不能結合的蛋白洗掉 洗脫，可以用蛋白電泳上樣緩衝液將beads上的抗體，蛋白，蛋白...
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純銅中鉍的共沉澱分離實驗中，反應中是否有氫氧化銅生成 乙醛與氫氧化銅反應 在naoh溶液中加入幾滴cuso4溶液，發生反應的離子方程式是 cu2 2oh cu oh 2 在其中加入乙醛溶液並加熱煮沸，可觀察到的現象是 溶液中出現磚紅色的沉澱，反應的化學方程式為 ch3cho 2cu oh 2ch3c...