1樓:聽風
在上世紀中葉(1950s)james watson 和 francis crick提出了著名的dna雙螺旋以及雙鏈間鹼基配對的模型,根據這個模型,他們進一步提出了dna複製的半保留模型(semiconservative model),雖然這個模型比當時並存的全保留模型(conservative 模型)看起來簡單易行的多,但始終缺乏有說服力的資料. 最後在2023年,當時在caltech作研究生的matthew meselson和作博士後的franklin stahl設計並實現了這組著名的,證明了dna複製半保留機理的實驗.
試驗中,他們先將大腸桿菌細胞培養在用15nh4cl作為唯一氮源的培養液裡養很長時間(14代),使得細胞內所有的氮原子都以15n的形式存在(包括dna分子裡的氮原子).這時再加入大大過量的14nh4cl和各種14n的核苷酸分子,細菌從此開始攝入14n,因此所有既存的“老”dna分子部分都應該是15n標記的, 而新生的dna則應該是未標記的.接下來他們讓細胞們繼續高高興興地生長,而自己則在在不同時間提取出dna分子,利用cscl密度梯度離心分離,而當細胞**了一次的時候只有一個dna帶,這就否定了所謂的全保留機理,因為根據全保留機理,dna複製應該通過完全複製一個“老”dna雙鏈分子而生成一個全新的dna雙鏈分子,那麼當一次複製結束,應該一半dna分子是全新(雙鏈都完全只含14n), 另一半是“全老”(雙鏈都完全只含15n).
這樣一來應該在出現在離心管的不同位置,顯示出兩條黑帶.
通過與全14n和全15n的dna標樣在離心管中沉積的位置對比,一次複製(**)時的這根dna帶的密度應當介於兩者之間,也就是相當於一根鏈是14n,另一根鏈是15n.而經歷過大約兩次複製後的dna樣品(generation=1.9)在離心管中顯示出強度相同的兩條黑帶,一條的密度和generation=1時候的一樣,另一條則等同於完全是14n的dna.
這樣的結果跟半保留機理推測的結果完美吻合。
2樓:秒懂百科精選
半保留複製:是dna複製的模式
3樓:旅泉典南風
首先,以含有n15標記的nh4cl培養液來培養大腸桿菌,讓其繁殖幾代,再將其轉移到n14的普通培養液中.然後在不同時刻收集大腸桿菌並提取dna,再將dna進行密度梯度離心,記錄其位置.若離心後有三條帶(自上而下為n15,n15/n14,n14),則可證明其為半保留
哪個實驗證明dna的半保留複製
4樓:聽風
在上世紀中葉(1950s)james watson 和 francis crick提出了著名的dna雙螺旋以及雙鏈間鹼基配對的模型,根據這個模型,他們進一步提出了dna複製的半保留模型(semiconservative model),雖然這個模型比當時並存的全保留模型(conservative 模型)看起來簡單易行的多,但始終缺乏有說服力的資料. 最後在2023年,當時在caltech作研究生的matthew meselson和作博士後的franklin stahl設計並實現了這組著名的,證明了dna複製半保留機理的實驗.
試驗中,他們先將大腸桿菌細胞培養在用15nh4cl作為唯一氮源的培養液裡養很長時間(14代),使得細胞內所有的氮原子都以15n的形式存在(包括dna分子裡的氮原子).這時再加入大大過量的14nh4cl和各種14n的核苷酸分子,細菌從此開始攝入14n,因此所有既存的“老”dna分子部分都應該是15n標記的, 而新生的dna則應該是未標記的.接下來他們讓細胞們繼續高高興興地生長,而自己則在在不同時間提取出dna分子,利用cscl密度梯度離心分離,而當細胞**了一次的時候只有一個dna帶,這就否定了所謂的全保留機理,因為根據全保留機理,dna複製應該通過完全複製一個“老”dna雙鏈分子而生成一個全新的dna雙鏈分子,那麼當一次複製結束,應該一半dna分子是全新(雙鏈都完全只含14n), 另一半是“全老”(雙鏈都完全只含15n).
這樣一來應該在出現在離心管的不同位置,顯示出兩條黑帶.
通過與全14n和全15n的dna標樣在離心管中沉積的位置對比,一次複製(**)時的這根dna帶的密度應當介於兩者之間,也就是相當於一根鏈是14n,另一根鏈是15n.而經歷過大約兩次複製後的dna樣品(generation=1.9)在離心管中顯示出強度相同的兩條黑帶,一條的密度和generation=1時候的一樣,另一條則等同於完全是14n的dna.
這樣的結果跟半保留機理推測的結果完美吻合。
5樓:猶雪晴集果
人的細胞先在含氮15的培養基和普通培養基上擴增,得到含氮15的dna和不含氮15的氮14dna的兩種細胞
下一步是將含氮15dna的細胞取適量轉移至普通培養基,
經過一代後,用氯化銫密度梯度離心等數量的三種細胞(只經過氮十四培養的、只經過氮十五培養的和兩種都經歷的),因為同位素的密度不同,一半氮十五一半氮十四的dna分子會在氮十五和氮十四的dna分子之間出現一個新的區帶,
兩代後的細胞離心和一代的比較會發現含有兩種氮的雜合的dna並不會增加,而氮十四的會加倍,
這說明dna在複製時會分成兩部分分別構成子代dna的一半,這些dna在多代後仍然保持其完整性
或者用放射性同位素標記法~!
用dna中含有的p
,s等進行標記`
然後分析`
6樓:溥蕾嘉知
n14和n15所做的同位素示蹤技術。
哪個實驗證明dna的半保留複製?真核生物的 要詳細。
7樓:匿名使用者
用經過同位素標記的含n15的細菌培養在用n14標記的鹼酸中培養,檢測後代第一代中的雙鏈一條含n14一條含n15
8樓:匿名使用者
科學家運用同位素示蹤技術
證明dna是半保留複製的試驗
9樓:匿名使用者
用聚合酶鏈式反du應(zhipcr)
pcr是現今dna體外複製dao的有效方法,通過專控制迴圈數可控制dna複製的代數
具體流程為屬:1、94攝氏度變性(破碎細胞,dna解螺旋,並變性成單鏈,時間較長)
2、94攝氏度變性(時間短)
3、低溫退火(據引物等實際情況確定溫度)
4、中溫延伸(一般為72攝氏度,這就是細胞中的複製過程)5、繼續延伸(時間短),該步驟可有可無
6、保溫(12攝氏度),據具體情況可以刪掉該步驟以上是dna複製一代的程式,如果需要增加複製代數,則用pcr儀進行2-4步的迴圈即可
具體知識可查閱《分子克隆》《分子生物學》等書
10樓:free我是你浩哥
半保留複製:是dna複製的模式
證明dna半保留複製的那個實驗,**等,求懂的人幫幫忙
11樓:鋼牙妹小詹
這個是看出來的,15n的分子質量大在下層,14n在上層,但是如果兩個不同時存在,就不能辨別,因為不知道密度梯度離心的介質中的物質與15n/14n的密度關係,如果知道的話應該是可以的
在證明dna進行半保留複製的實驗中,科學家的實驗思路是什麼?實驗方法是什麼?實驗中會出現幾條dna帶
12樓:
在證明dna是半保留複製的實驗中,科學家用了同位素標記和離心方法,實驗思路是離心方法可以把不同重量的dna分開。
某同學通過實驗驗證dna是半保留複製還是全保留複製
13樓:兄弟連教育北京總校
是這樣的,標記是用同位素標記的,由於同位素有放射性,所以很容易被檢測到。我們現在是已知半保留複製,而在當時只是一種猜想。用普通大腸桿菌啊無法檢測複製行為的,但是用標記鏈就清晰多了,1代以後標記鏈佔1/2,2代2/8,3代2/16...
以此類推,說明這兩條分開並且被保留,這樣就推翻了全保留複製、解體複製等幾種猜想了。
14樓:匿名使用者
在2023年代的時候,美國有兩個科學家用一中細菌做了實驗。
這種細菌的營養**(食物)是ammonium nitrate,它裡面就有n的成分。他們兩個人運用了同位素的原理:自然界中最常見的氮元素是氮-14但自然界中也有氮-15這種同位素,所以他們向細菌第一次放含有氮-15的ammonium nitrate,然後他會produce dna,細菌溶解在caesium chloride 溶液裡面,dna會在溶液的靠底部,然後我們再把這群細菌拿出來放到有氮十四的試管內,dna會分節,以此類推,後面產生的dna都會分開,這就證明了半保留複製
15樓:鬆玉蘭酒庚
人的細胞先在含氮15的培養基和普通培養基上擴增,得到含氮15的dna和不含氮15的氮14dna的兩種細胞
下一步是將含氮15dna的細胞取適量轉移至普通培養基,
經過一代後,用氯化銫密度梯度離心等數量的三種細胞(只經過氮十四培養的、只經過氮十五培養的和兩種都經歷的),因為同位素的密度不同,一半氮十五一半氮十四的dna分子會在氮十五和氮十四的dna分子之間出現一個新的區帶,
兩代後的細胞離心和一代的比較會發現含有兩種氮的雜合的dna並不會增加,而氮十四的會加倍,
這說明dna在複製時會分成兩部分分別構成子代dna的一半,這些dna在多代後仍然保持其完整性
如何證明生物的dna複製方式是半保留複製
16樓:
有關雙鏈dna(1、2鏈)與mrna(3鏈)的鹼基計算:
①dna單、雙鏈配對鹼基關係:a1=
t2,t1=a2;a=t=a1+a2=t1+t2,c=g=c1+c2=g1+g2.a+c=g+t=a+g=c+t=1/2(a+g+c+t);(a+g)%=(c+t)%=(a+c)%=(g+t)%=50%;(雙鏈dna兩個特徵:嘌呤鹼基總數=嘧啶鹼基總數)
dna單、雙鏈鹼基含量計算:(a+t)%+(c+g)%=1;(c+g)%=1―(a+t)%=2c%=2g%=1―2a%=1―2t%;(a1+t1)%=1―(c1+g1)%;(a2+t2)%
=1―(c2+g2)%.
②dna單鏈之間鹼基數目關係:a1+t1+c1+g1=t2+a2+g2+c2=1/2(a+g+c+t);
a1+t1=a2+t2=a3+u3=1/2(a+t);c1+g1=c2+g2=c3+g3=1/2(g+c);
③a.dna單、雙鏈配對鹼基之和比((a+t)/(c+g)表示dna分子的特異性):
若(a1+t1)/(c1+g1)=m,則(a2+t2)/(c2+g2)=m,(a+t)/(c+g)=m
b.dna單、雙鏈非配對鹼基之和比:
若(a1+g1)/(c1+t1)=n,則(a2+g2)/(c2+t2)=1/n;(a+g)/(c+t)=1;若(a1+c1)/(g1+t1)=n,則(a2+c2)/(g2+t2)=1/n;(a+c)/(g+t)=1.
④兩條單鏈、雙鏈間鹼基含量的關係:
2a%=2t%=(a+t)%=(a1+t1)%=(a2+t2)%=(a3+u3)%dna複製時分三步:解旋,配對,復旋.
複製時遵循鹼基互補配對原則,a與t之間以雙鍵連線,c與g之間以三鍵連線.
dna複製是半保留複製,一個dna複製n代後產生的子代dna數目是2的n次方個.含有原來母鏈的dna有2個.
=t1%+t2%=a1%+a2%;
2c%=2g%=(g+c)%=(c1+g1)%=(c2+g2)%=(c3+g3)%
=c1%+c2%=g1%+g2%.
丶軟弱204 2014-10-19
追問:另求關於1個全部被氮15標記的dna複製n代後關於dna的各種分子數計算公式,謝謝
追答:①親代有1條dna,n次複製後,有2^n條dna,去除親代1條,複製後dna多出了2^n-1條 所以,需要消耗的遊離的脫氧核糖核苷酸為m×(2^n-1)個 ②由半保留複製原理可知:複製n代後,共有2的n次方個dna分子,這些分子中共有m乘2的n次方個該種脫氧核苷酸,其中包括最保留下來的m個。
因此,經過經過n代複製共消耗遊離的脫氧核苷酸個. 由於第n次複製為第n-1代到第n代,dna分子數由2的n-1次方個增加到2的n次方個,增加了2的n-1次方個,因此需該脫氧核苷酸為m×(2^n-1)個
證明dna是半保留複製的試驗,哪個實驗證明DNA的半保留複製
用聚合酶鏈式反du應 zhipcr pcr是現今dna體外複製dao的有效方法,通過專控制迴圈數可控制dna複製的代數 具體流程為屬 1 94攝氏度變性 破碎細胞,dna解螺旋,並變性成單鏈,時間較長 2 94攝氏度變性 時間短 3 低溫退火 據引物等實際情況確定溫度 4 中溫延伸 一般為72攝氏度...
怎樣用實驗原理來證明dna是半保留複製
在僅以15nh4c1為氮源的培養基裡,使大腸桿菌繁殖數代,將其dna用重同位素15n標記上,然後立即將大腸桿菌轉移到14nh4c1培養基中繼續培養,按不同時間取樣品抽提dna,採用氯化銫密度梯度離心法分析。結果表明dna分子在0代顯示重密度 hh 1代全部為中等密度 hl 2代表現為中等密度 hl ...
證明DNA複製方法的實驗
氯化銫超bai速離心時,鹽離子由於受到du 強大的離zhi心力而被拉向離dao心管底部,同時溶液內中存在的擴散作用與容離心力相對抗,使cs 與cl 分散在整個溶液中,cscl經過離心後,溶液達到一種平衡狀態,擴散和沉澱的兩種相對力量保持平衡,形成一個連續的cscl濃度梯度,溶液的密度在離心管底部最大...