1樓：黎明晴空
用固氮酪蛋白分析測定的蛋白酶活性
像之前所說的(scholze and tannich 1994)一樣再通過一些小小的修飾就可以進行分析了。簡單地講，就是寄生蟲溶菌液加入2mmddt 在37℃保溫10分鐘，以啟用蛋白酶的活性。準備100 μl （5 mg/ml）的固氮酪蛋白溶液，加入100 μl 的寄生蟲溶菌液在37℃保溫1個小時。
加入300 μl 10%的三氯乙醯酸來終止反應，然後將樣品在冰中保溫30分鐘。通過離心(5,000×g, 5 min)除去未被消化的固氮酪蛋白，將剩下的上清液轉移到已加入500μ(525 mm) naoh的乾淨試管中。用分光光度計(tecan magellan)測定其在442 nm處的吸光度。
為了便於控制，將溶菌液在90℃保溫15分鐘以滅活酶活性，然後
加入100 μl胰蛋白酶(2.5 mg/ml)用以正調節。
明膠—sds—page分析蛋白酶
這種sds—page需要蛋白溶液和明膠，而明膠通常用丙烯醯胺凝膠。電泳之後，蛋白質會侵入明膠，用coomassie brilliant藍染色後會出現多條清晰的帶。用—sds—page分析分離物b的細胞消化液(40 μg)的蛋白酶活性(lockwood et al.
1987)要用到laemmli (1970). 的sds—非連續緩衝系統。凝膠分解和分層後的丙烯醯胺濃度分別是12.
5 and 5%。簡而言之，0.2% (w/v)的明膠能聚合成有分解作用的凝膠。
這樣樣品就不用加熱，蛋白酶也就不會失去酶活性了。電泳1.5小時(30ma 的直流電)後,加入2.
5% (v/v) triton x-100不斷的輕搖凝膠1小時,這樣做不但能除去sds,還可以啟用蛋白酶的活性.將凝膠浸入已加了1 mm dtt的緩衝液中在37℃保溫3個小時,蛋白酶帶將逐漸.用 0.
12% (w/v) coomassie brilliant 藍 r-250 染色 30分鐘這些蛋白酶帶就能顯現出來了。還可以用12.5%的明膠--天然的凝膠（不含sds）分析細胞溶菌液,確定蛋白酶的數目,同時研究它有幾個亞基.
蛋白酶的抑制作用
可以通過將處理過triton的凝膠放入含有1 mm dtt的保溫的緩衝液保溫來研究抑制劑對酵母菌蛋白酶活性的影響，確定酵母菌中蛋白酶的種類，ddt中含有下列抑制劑的一種：ia，edta，tlck，8--羥喹啉 ，pmsf（都是1mm）；胃蛋白酶抑制劑a或者亮肽酶素，抗痛素（都是100 μg/ml）。除了胃蛋白酶抑制劑a，ia和pmsf外所有的抑制劑都可以從sigma買到。
凝膠可以用coomassie brilliant藍染色。
問題補充：分析固氮酪蛋白時，在含有固氮酪蛋白的保溫1小時寄生蟲溶菌液加入相同濃度的蛋白酶抑制劑（ia，tlck，胃蛋白酶抑制劑，edta）。
最適ph的測定
酵母菌蛋白酶活性與ph的關係可以通過在將處理過triton x—100的凝膠放在ph（在ph3.0—8.5的範圍內）不同的緩衝液中保溫來測得。
緩衝液的配製如下：0.1 m甘氨酸/hcl (ph 3.
0), 0.1 m乙酸鈉/醋酸(ph 4.0 and 5.
5), 0.1 m磷酸鈉(ph 7.0 and 7.
6), and 0.1 m tris–hcl (ph 8.5)。
所有的保溫緩衝液都含有1 mm dtt，因此可用coomassie brilliant藍染色凝膠。對於固氮酪蛋白的分析，可以用寄生蟲溶菌液在含有1 mm dtt不同的ph保溫1小時。
2樓：匿名使用者
你這樣做只能得到機譯~把文章分成小塊~再提問~正確率會高很多~正規翻譯需要時間~分成小部分吧~
請大家幫忙翻譯一下
3樓：里拉
如何擺脫老虎?
兩個人正穿越叢林。突然，他們看見大概一百米遠的地方有隻老虎。
其中一個人從揹包裡拿出一雙「耐克」，並開始穿鞋。
另外一個人問：「你覺得你穿上它們能跑得比老虎快嗎?」
他的朋友回答說：「我不需要跑的比老虎快，我只要跑的比你快就行了。」
媽媽睡個好覺
一天，約翰下班回家。他看見妻子在輕輕搖著女兒。他們的女兒才半歲。妻子向寶寶說了很多次的「爸爸」。約翰很高興，因為妻子選擇「爸爸」作為第一個教給女兒的詞。
幾周後的一個晚上，約翰和妻子注意到了女兒在哭著叫爸爸。他的妻子對他說：「親愛的，女兒在叫你呢。」接著她轉了個身繼續睡覺了。約翰就不得不起床了。
（手打有誤見諒 (‵▽′)/）
4樓：可親的舊光陰
old the family that afte
大家幫忙翻譯一下，謝謝啦！！！
5樓：匿名使用者
你好，人工精確翻譯"
我想在這個寒假裡堅持做更多的訓練。我想好好休息。並且我會根據我的愛好計劃我的學習。
我會按時完成作業，用一些時間去讀書並且好好掌握它們。我將邀請一些我的朋友去溪邊釣魚。我會幫助我的家人做更多的家務活。
這就是我的寒假計劃，你呢？請儘快回覆我。
你的摯友（朋友）
祝你學習進步有不明白的可以追問！如果您認可我的回答請點選下面的【選為滿意回答】按鈕，謝謝！
6樓：匿名使用者
我想要抓住這個寒假多做運動。我想有一個良好的休息，我會計劃研究自己的興趣，我會按時做家務。我會花一些時間閱讀書籍。
我想善於他們。我會拜訪我的一些朋友和去河邊釣魚。我也會幫助我的家人做更多的家務事。
這是我的假期計劃。你怎麼樣？請儘快給我寫信。
此致，xx(你的名字)
7樓：甜蜜蜜
今年寒假我打算繼續做更多的練習。我想要好好休息一下並且我計劃按照我個人的興趣去學習。我會按時完成作業。
我打算花些時間讀書。 想要擅長於此。我會去拜訪朋友們，還要去河邊釣魚。
我還要幫家人多做些家務活。
這就是我的假期計劃。你怎麼計劃的呢？請儘快回覆我哦！
此致 敬禮
8樓：匿名使用者
我想抓住這個冬天holiay多做運動。我想好好休息一下。我將自己的興趣學習。
我會按時做家務。我要花一些時間讀書。我想他們。
我將拜訪我的一些朋友在河邊釣魚。我也會幫助我的家人做更多的家務。這是我的假期計劃。
你呢？請儘快給我寫信。你的，
9樓：匿名使用者
這個寒假我堅持想要多做一些練習。我想好好休息一下，並且我想要依據我自己的興趣來安排學習。我將會及時的做家務，並且我會花更多的時間來讀書，我想擅長他們。
我將會拜訪我的一些朋友並在河裡釣魚。我也會幫助我的家人做更多的日常瑣事。
這就是我的假期計劃，你的呢？請趕快回信給我吧。
你親愛的。。
祝你學習更進一步`(*∩_∩*)′
10樓：美麗天使
我想堅持多做運動holiay這個冬天。我想好好休息一下。我將計劃去學習自己的興趣。
我將做家務在時間。和我要花一些時間閱讀書籍。我想擅長它們。
我將拜訪我的一些朋友和去釣魚在河邊。我也會幫助我的家人做更多的家務。這是我假期的計劃。
你呢?請儘快給我寫信。你
請大家幫忙翻譯一下，謝謝！
請大家幫忙翻譯一下下面這段日文
11樓：蘇州上達日語
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以上請參考
請大家幫幫忙，翻譯一下...
12樓：鍋包肉你吃麼
很多人以為，但他們變得成功和富有時，幸福便會接踵而至了。
讓我告訴你吧，那並不是事實。這個世界上到處都是生活痛苦的富人，就好像生活在地獄裡。我們知道很多電影明星自殺或吸毒致死的故事。
顯然，錢並不能解決一切問題。通過不正當手段獲得的財富不會帶來快樂。中彩票不會，賭博也不會。
在我看來，幸福的祕密在於你的努力工作。。你的貢獻對別人的幸福來說，沒什麼意義。但是你通過你的辛勤勞動積攢到了財富。
如果你靠運氣 或者其他不誠實的方法 ，你會發現那種錢不會讓你有成就感。
如果你是利用他人或傷害他人獲得財富，你也不會覺得幸福。
你會認為自己是個底層的人員。
長期的快樂建立在 誠實 殷勤工作 貢獻和自尊上的。幸福不會是終點，它只是一種過程。他是 始終如一的誠實 對他人作出貢獻的卓越工作 並會讓你覺得自己是個對社會有用的人。
就像韋恩教授寫的：沒有一條路通往幸福，幸福是我們前進的方向。
當有一天，我的目標實現時，我有一輛自己的車 房子 並擁有自己的事業，那時我會感到真正的快樂。
生活不會那樣，如果你寄希望於外界環境，希望發生什麼特定的事情來讓你變得快樂，你會覺得很難實現你的快樂。 你一定會錯過生命中的其他
13樓：匿名使用者
要是短的就給你翻譯了、、、、主要講有錢人不一定幸福，幸福是基於誠實，有效率的工作，奉獻。這是很基礎的文章，還是自己好好學英語比較好哦！
14樓：匿名使用者
讀了一遍，沒有長難句，lz自己翻譯吧
15樓：
很多人相信當他們變得富有而成功時，幸福自然到來。讓我告訴你，實際上並非如此。這個世界充滿了非常富有而卻象生活在地獄般痛苦的人。
我們都看過一些自殺或吸毒而死電影明星的故事。無疑，錢不是所有問題的唯一答案。不義之財不會帶來幸福，中獎不會帶來幸福，賭博贏來的錢也不會帶來幸福。
據我看來，幸福的祕密潛藏在工作的成功中。說什麼你的貢獻給別人帶來幸福，你的財富來自你的正直努力是沒有用的（感覺這句話沒說完？）。
僥倖或通過不義之舉得到的財富，你知道那只是不義之財。而靠利用或傷害他人賺的錢也不會使你幸福。你會覺得自己是個卑鄙的人。
長期的幸福是以正直、努力工作、貢獻和自尊為基礎的。幸福不是結果，而是過程。不斷正直努力工作，對別人做出真正的貢獻會使你感到你是一個有用的、有價值的人。
正如韋恩博士所說的「沒有通向幸福之路，幸福本身就是路」。「有一天當我達成這些目標：有了車，建了房子並擁有自己的公司，那我會真正感到幸福」生活並非如此。
如果你只是等待事情發生，並希望生活的外部環境的改變使你幸福，這永遠行不通。只會錯過生活。
這怎麼象中國人寫的作文。。。
請大家幫我翻譯一下請大家幫我翻譯一下好嗎
原文 子罕抄說寶 宋人bai或得玉，獻諸子罕，子du罕弗受。獻玉者曰 zhi 以示玉人，玉人以為寶也，故dao敢獻之。子罕曰 我以不貪為寶，爾以玉為寶，若以與我，皆喪寶也，不若人有其寶。稽首而告曰 小人懷璧，不可以越鄉，納此以請死也。子罕置諸其裡，使玉人為之攻之，富而後使復其所。左傳 襄公十五年 譯...
請大家幫忙看一下這塊玉，請大家幫忙辨別一下這塊玉的真假
看是天然翡a貨,糯種飄花的一個掛件，寓意應該是一帆風順，招財進寶的意思。顏色發灰暗色系，雕工一般，屬於一般的市場貨，但是東西天然可以放心佩戴，謝謝 天然 a 貨飄綠糯種翡翠海螺型掛飾。有一定收藏價值。請大家幫忙辨別一下這塊玉的真假 多正常，刀刮肯定有印。這種成色的又不貴 這塊玉的油潤度還有色澤都挺不...
請大家幫忙分析評論一下這個事情，請大家幫忙分析一下這句話的含義
女方遇到了一個不負責任的男人，如果繼續在這件事情上糾纏，那麼浪費的已經不僅僅是前幾年的青春，連現在的和以後和都會浪費。所以，放手，什麼條件都不談了，尋找自己新的感情。對他，如同陌路。他會受到別的懲罰的，即使他們不離婚了，但是她妻子會懲罰他的。而女方，難道自己沒有責任嗎？先給你解釋一下什麼叫加油卡，加...