酶的分離提取和純化
1樓：乙豔
可以從該酶有三個不同的亞基出發，由於它是結合酶，所以我們可以用柱層析的方法，特異性吸附。
首先我們破碎細胞，過濾，把雜質去掉。可以用硫酸銨沉澱下，再根據分子量膜過濾下，然後根據它的特性設計乙個柱子，能夠特異性的吸附它---過柱---洗脫---收集，就搞定了。
如果你知道該酶的其他特點，也可以從其他角度入手，不如溶解度，變性等。
試述酶的分離純化和純度鑑定的實驗方法及其原理。
2樓：鄂州愛民
分離蛋白質混合物的各種方法主要是根據蛋白質在溶液中的以下性質：1）分子大小；2）溶解度；3）電荷；4）吸附性質；5）對其它分子的生物學親和力等進行分離。 常見的分離提純蛋白質的方法有：
1、鹽析與有機溶劑沉澱：在蛋白質溶液中加入大量中性鹽，以破壞蛋白質的膠體性質，使蛋白質從溶液中沉澱析出，稱為鹽析。常用的中性鹽有：
硫酸銨、氯化鈉、硫酸鈉等。鹽析時，溶液的ph在蛋白質的等電點處效果最好。凡能與水以任意比例混合的有機溶劑，如乙醇、甲醇、丙酮等，均可引起蛋白質沉澱。
2、電泳法：蛋白質分子在高於或低於其pi的溶液中帶淨的負或正電荷，因此在電場中可以移動。電泳遷移率的大小主要取決於蛋白質分子所帶電荷量以及分子大小。
3、透析法：利用透析袋膜的超濾性質，可將大分子物質與小分子物質分離開。4、層析法：
利用混合物中各組分理化性質的差異，在相互接觸的兩相（固定相與流動相）之間的分佈不同而進行分離。主要有離子交換層析，凝膠層析，吸附層析及親和層析等，其中凝膠層析可用於測定蛋白質的分子量。5、分子篩：
又稱凝膠過濾法，蛋白質溶液加於柱之頂部，任其往下滲漏，小分子蛋白質進入孔內，因而在柱中滯留時間較長，大分子蛋白質不能進入孔內而徑直流出，因此不同大小的蛋白質得以分離。6、超速離心：利用物質密度的不同，經超速離心後，分佈於不同的液層而分離。
超速離心也可用來測定蛋白質的分子量，蛋白質的分子量與其沉降係數s成正比。
蛋白質提取分離純化鑑定的實驗方案
3樓：匿名使用者
方案，這個太誇張了吧！？蛋白質分離提純：1、預處理：
細胞破碎（方法：動物細胞用勻漿器，組織搗碎機，超聲波，丙酮乾粉等；植物細胞用石英砂研磨或纖維素酶處理；微生物用超聲振盪，研磨，高壓，溶菌酶，細胞自溶等），抽提（可溶蛋白用鹽酸，脂蛋白用稀sds或有機溶劑，不溶蛋白用稀鹼，抽提原則少量多次）；2、粗提：主要是為了除去糖、脂類、核酸及大部分雜蛋白，並將蛋白濃縮。
沉澱法（核酸沉澱法，蛋白沉澱法，選擇變性）；分級法（鹽析或有機溶劑）；除鹽和濃縮（除鹽方法為透析，分子篩；濃縮方法為反透析，凍幹，超濾等）；
如何進行質粒dna的分離，純化和鑑定
4樓：匿名使用者
分離質粒時，可以將質粒去得很乾淨。方法為：先用te之類的試劑將菌液懸浮起來，再用naoh和sds將菌液裂解（起裂解作用的主要是naoh，但此時，sds可以與蛋白很好的結合）。
第三步，加入酸中合第二步中的鹼，並且將sds沉澱下來，同時，sds和蛋白也一起沉澱下來，而基因組上面有很多的蛋白，這樣基因組就一起沉澱下來，上清只有質粒了。上清的質粒用乙醇沉澱，這樣得到的質粒基本沒有基因組。而分離基因組時，一般也是用sds裂解（想對於鹼裂解，sds比較溫和）。
同時還用蛋白酶k處理，將基因組上的蛋白降解掉，這樣就得到了基因組dna。再用乙醇沉澱，去掉其他的東東。如果菌中含有質粒，質粒也一起提出來，無法去掉。
至於後來的試劑盒，如柱式，前其原理一樣，不過最後一步純度是用柱子的方法。
關於酶純化的一道生化題目
5樓：湯萌
總活性單位/總蛋白=酶比活力（u/mg）
最有效的步驟即比活力首次增加最大的步驟，也就是親和層析。
效率最低的步驟也就是酶活力損失最大的步驟，即ph沉澱。
表中結果無法指示蛋白質絕對純度。評價純度的方法還有：sds-page電泳（條帶是否單一），層析色譜（峰型是否平滑完整）等等。
6樓：都會變成傻子
a.酶溶液的比活。
就是各純化步驟對應的總活力/總蛋白。
單位均為u/mg
b. 4c. 3
d. 有，比活在第6步無增加，可用sds-page評估。
蛋白質分離純化的四種方法
7樓：常山趙子龍
1、鹽析法：
鹽析法的根據是蛋白質在稀鹽溶液中，溶解度會隨鹽濃度的增高而上公升，但當鹽濃度增高到一定數值時，使水活度降低，進而導致蛋白質分子表面電荷逐漸被中和，水化膜逐漸被破壞，最終引起蛋白質分子間互相凝聚並從溶液中析出。
2、有機溶劑沉澱法：
有機溶劑能降低蛋白質溶解度的原因有二：其。
一、與鹽溶液一樣具有脫水作用；其。
二、有機溶劑的介電常數比水小，導致溶劑的極性減小。
3、蛋白質沉澱劑：
蛋白質沉澱劑僅對一類或一種蛋白質沉澱起作用，常見的有鹼性蛋白質、凝集素和重金屬等。
4、聚乙二醇沉澱作用：
聚乙二醇和右旋糖酐硫酸鈉等水溶性非離子型聚合物可使蛋白質發生沉澱作用。
C利用公式PI 4 1 1 7計算PI的近似值
由於s與i都為整型，s i的結果會取整。將pi pi s i 改為pi pi s 1.0 i 並且輸出結果時將pi改為pi 4。更改制以下即可 pi pi double s i 否則s i是按整型取結果的 親測可用，呵呵，望採納。include void main printf 此數約為 2f 4 ...
已知每日利息的值，如何算年化利率
公式為 利率 利息 本金 時間 100 利息 本金 利率 時間 100 4.2 4.2元 最後取款100 4.2 104.2元。計算 如存款100元，銀行答應付年利率4.2 那麼未來一年銀行就得支付 4.2元利息 計算公式是 100 4.2 4.2元 拓展資料 一 年利率 年利率是指一年的存款利率。...
已知tana3,求tana4分之拍的值謝謝謝謝
tan a 4 tana tan 4 1 tana tan 4 3 1 1 3 1 2沒有疑問請採納為滿意答案,謝謝。知道tana的值如何求tan a 4 這種,順便舉個例子 答 你可以用兩角和的正切公式啊。比如 已知tan60 3,求tan105 的值 解 tan105 tan a b tana ...