1樓:匿名使用者
蛋白質電泳
條帶復怎麼看
不能嚴格制定量,只能互相比較bai。 無論什麼染色法du,條帶亮度會zhi隨著染液多少及dao染色時間的不同而變化,無法嚴格定量。 page的作用更多的是看目的條帶的大小,以及兩個樣品中相同蛋白互相比較多少。
不能精確算出是多少ug或ng。
1.直接將帶條帶的凝膠放在 凝膠呈像系統 中進行定量分析.
2.將所需要的條帶剪下下來,用x體積蒸餾水溶解,通過紫外分光光度計在280nm條件下,測定吸光度a值.根據儀器目前標準曲線計算蛋白質濃度,與蒸餾水體積x相乘,得到蛋白質質量.
3.如果樣品中含有熒光成分,可以進行熒光分析.
我是初學者,跑出來的蛋白電泳圖,那些一排一排的條帶是什麼意思,還有一列一列的
2樓:匿名使用者
你的膠是考染的嗎?
首先你得先知道一點蛋白質的基本理論知識(不會不知道吧?難道你是學醫的?),或者說蛋白質(包括其他分子,如dna、rna等)電泳的原理(或者說是分離原理)。
只說蛋白質:蛋白質在正常情況下,一般帶有負電荷,因由不同的蛋白分子因為性質(空間結構以及基團性質)不同而帶電量不同,這樣結合蛋白質分子本身的不同質量,會在電場下(即電泳中)產生不同的移動速度,進而將不同的蛋白分離開。又為了消除蛋白質分子間性質的差別,創造一個單一因素的電泳分離條件,所以在進行蛋白質電泳之前,都會對蛋白質進行變性處理(非變性膠等不在此列),使蛋白質肽鏈開啟:
sds是陰離子去汙劑,作為變性劑和助溶試劑,它能斷裂分子內和分子間的氫鍵,使分子去摺疊,破壞蛋白分子的
二、**結構。而強還原劑如巰基乙醇,二硫蘇糖醇能使半胱氨酸殘基間的二硫鍵斷裂。在樣品和凝膠中加入還原劑和sds後,分子被解聚成多肽鏈,解聚後的氨基酸側鏈和sds結合成蛋白- sds膠束,所帶的負電荷大大超過了蛋白原有的電荷量,這樣就消除了不同分子間的電荷差異和結構差異。
如此,蛋白質(準確的說應該是變形後的蛋白質或者是蛋白- sds膠束)便會在電場中根據不同的帶電量- 亦即分子量而分成不同的條帶。每一條帶代表著不同分子量大小的蛋白質組合(一組蛋白質)。
上面只說的是sds-page膠蛋白質電泳。當然,在電泳後,需要進行染色,你才能看到蛋白條帶(marker除外,因為它是帶有耦合染料的蛋白質分子或片段)。
3樓:匿名使用者
一個條帶代表一種氨基酸。電泳的原理生化書上自己看
4樓:一直嚮往安靜
給個圖才能解釋。不給圖怎麼解釋啊
如何根據電泳法來判別蛋白質的大小?
5樓:匿名使用者
如果你的蛋白質可bai
能的du異源二聚體中兩個亞基大小有差異zhi(例dao如一個30kd,另一個50kd),那直接用sds-page就可
版以了.在sds和dtt/beta-me作用下權二聚體中的兩個亞基會完全分開,在泳道中按照分子量大小遷移,如能產生兩個大小不同含量相近的條帶則是異源二聚體,否則是同源二聚體.如果你可能的異源二聚體中的兩個亞基大小基本相同,則sds-page只能顯出一條帶,這時候你得藉助輔助手段(質譜鑑定,western等)鑑定,或者嘗試二維電泳,根據兩個亞基不同的電荷,分子量區分.
6樓:匿名使用者
你好,在電泳實驗中,分子質量大的蛋白質,移動的距離短,而分子質量較小的蛋白質,移動的距離長
血清蛋白電泳時,條帶前面是什麼,順序是什麼,為什麼
7樓:匿名使用者
alb,α1-球蛋白,α2-球蛋白,β-球蛋白,γ-球蛋白
蛋白質和氨基酸都是兩性電解質,其分子中的羧基(—cooh)和氨基(—nh2)在溶液中均可解離.血清蛋白質的等電點均低於ph7.0,在ph8.
6的緩衝液中帶負電,向陽極移動,分子小且帶電荷多者,則移動速度較快,反之亦然.根據在電場中移動速度之快慢則將血清蛋白分為alb,α1-球蛋白,α2-球蛋白,β-球蛋白及γ-球蛋白
8樓:匿名使用者
條帶前面是清蛋白順序是:清蛋白 α1球蛋白 α2球蛋白 β球蛋白 γ球蛋白原因是各種血清蛋白的帶電性和質量不同
蛋白質電泳問題蛋白質電泳問題
我做過g 25柱，效果不錯。我所在小組也用過磷酸緩衝液做純化，也用透析除鹽，同樣也遇到過和你一樣的問題，洗脫峰明明有光吸收，可是就是跑膠沒帶，現在這個問題已經解決，呵呵，很有可能你跟我們的問題一樣。問題關鍵是 蛋白濃度！我們的蛋白本身易降解，且純化率低，蛋白濃度很低，再加上透析 除鹽等複雜步驟，脆弱...
蛋白質電泳,關於蛋白質電泳的問題
首先蛋白質電泳,通常是指sds page,這種電泳的特點是蛋白主要是按其大小分離開的。內 1 如果這容兩部分的肽鏈大小一樣,還是一條帶 2 n種蛋白未必是n條帶,有可能有大小一致的重疊在一起 3 肽鏈是蛋白質的一級結構序列,蛋白質是肽鏈經過盤曲摺疊形成的具有一定空間結構的物質。sds page之前會...
怎麼補充蛋白質，怎樣補充蛋白質？
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