1樓:匿名使用者
一般抗體bai的說明上,都du給出了一個範圍,zhi
一抗為1:200-2000,二抗為1:1000-10000。
western blot 的原dao理:本質是抗原抗體回反應。第一抗體就是能和非答抗體性抗原(特異性抗原)特異性結合的蛋白。
種類包括單克隆抗體和多克隆抗體。第二抗體是能和抗體結合,即抗體的抗體,其主要作用是檢測抗體的存在,放大一抗的訊號。
2樓:匿名使用者
一般根據抗體的特異性和親和度。一抗的濃度範圍比較大,從1:200到1:
1000都有,這個要多做幾次才能確定。二抗的稀釋倍數打,一般用1:5000到1:
10000就可以了。
3樓:賽智創業
一般抗體的說明上,都給出了一個範圍,可以以這個範圍為根據摸索。一般一抗為1:200-2000,二抗為1:1000-10000.
希望我的回答對您有幫助。
western blot的一抗、二抗可以重複用麼?一般可以用幾次?
4樓:
儲存得當的話,一抗工作液可重複利用2-3次一般不影響效果,但也不絕對,主要是看你的抗體本身如何,如果第一次做出來效果就不理想就不提倡這麼做了。二抗還是算了吧!那麼便宜,扔了不可惜。
western glut4一抗,二抗怎麼配置
5樓:匿名使用者
配製抗抄體的時候有兩樣東西比較關鍵:bai
溶解抗體的溶液或稀釋du液,通常如果只是溶zhi解抗體,可能會建議dao用pbs或者tbs,提供中性環境,以幫助抗體的儲存。如果已經是液體,只是需要稀釋做實驗的話,一般會用封閉液(bsa溶液,脫脂奶粉,注脫脂奶粉稀釋後的抗體無法再次使用),或者是洗液(tbst或pbst)。
抗體的濃度,一抗濃度建議參考抗體說明書選擇稀釋倍數,二抗濃度建議參考底物說明書配製。
western一抗和二抗的稀釋倍數一般是多少?
6樓:匿名使用者
一般抗bai體的說明上,都給出du了一個範圍,一抗為zhi1:200-2000,二抗dao為1:1000-10000。
western blot 的原理:本質是抗原抗版體反應權。第一抗體就是能和非抗體性抗原(特異性抗原)特異性結合的蛋白。
種類包括單克隆抗體和多克隆抗體。第二抗體是能和抗體結合,即抗體的抗體,其主要作用是檢測抗體的存在,放大一抗的訊號。
做western blot一抗二抗怎麼選?新手求有經驗的大神指教 60
7樓:匿名使用者
首先查文獻,看有沒有相關人做過相應的蛋白,其次去幾個大的國際化試劑公內司**容查有沒有商業化的抗體。。如果都沒有,就只能自己做了。。一抗一半是來自老鼠,那麼二抗就可以選擇針對鼠源的抗體,並且二抗看你需要什麼顯色方式,hrp或者是ap的。。。
8樓:anyuan在路上
1、首先看你做的動物是人、大鼠、小鼠、還是兔等等?確定好這個之後,在購買一回抗的時候,就要選擇抗以上
答這些種屬的抗體。
說簡單一點,比如:你的實驗動物是大鼠。那麼一抗就應該是某某抗大鼠,某某就是你一抗的種屬**(host species),假如你的一抗是兔**的,也就是兔抗大鼠,二抗就應該是某某抗兔,一般常見的是山羊抗兔的二抗。
明白了麼?
抗體在一個實驗過起著關鍵的作用,一抗二抗一定要選對,要不然其他的操作都是徒勞。
westernblot的一抗和二抗都可以用多克隆抗體嗎
9樓:匿名使用者
western blot的一抗和二抗都
來可以用多克隆
源抗體不過多克隆抗體因為有bai
多個結合位點du,事實上的zhi特異性並不如單dao克隆抗體,所以一般western blot都儘量要求使用單克隆抗體。以保證實驗結果準確可靠
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