1樓:匿名使用者
最常見的是樣本的擴增效率很差,所以到了平臺期也不是很強,這樣基線就相對很高了。
熒光定量pcr擴增曲線基線過高什麼原因
2樓:龍鳳油洺月
探針濃度過高;
體系中有熒光物質汙染;
擴增效率低
3樓:匿名使用者
我師兄用biog熒光定量pcr試劑盒擴增效果特別好,曲線非常典型,反應速度也很快,沒有遇到這個問題
熒光定量pcr擴增曲線基線過高什麼原因
4樓:zd混混
rox加多了,終濃度太高?
或者模板量,pcr擴增效率低下?
5樓:小痕求解
模板量的問題,改一下試試
6樓:匿名使用者
你的背景太高了,降低探針用量!
熒光定量pcr中擴增曲線能說明什麼問題
7樓:首暢郎凌雪
在熒光法定量pcr中溶解曲線直接表示了引物的特異性,如果是單一的峰,那麼我們要看的是tm值在**,通常情況下都是80---90之間,如果太小那可能擴增出來的不是你想要的片段就是引物二聚體,如果兩個峰那就說明出現了非特異性擴增
熒光定量pcr中擴增曲線能說明什麼問題?
8樓:卡哇伊o0小櫻
在熒光法定量pcr中溶解曲線直接表示了引物的特異性,如果是單一的峰,那麼我們要看的是tm值在**,通常情況下都是80---90之間,如果太小那可能擴增出來的不是你想要的片段就是引物二聚體,如果兩個峰那就說明出現了非特異性擴增
9樓:匿名使用者
可以看出是否有雜合的基因片段
10樓:匿名使用者
說明模板的濃度。。。
熒光定量pcr中擴增曲線能說明什麼問題
11樓:南京金益柏生物科技****
在熒光法定量pcr中溶解曲線直接表示了引物的特異性,如果是單一的峰,那麼我們要看的是tm值在**,通常情況下都是80---90之間,如果太小那可能擴增出來的不是你想要的片段就是引物二聚體,如果兩個峰那就說明出現了非特異性擴增
目的基因的擴增曲線,都怎麼看,定量pcr目的基因擴增曲線不好但是ct值很高怎麼回事
你好,擴增曲線可以粗略地判斷擴增效率。sybr green的雙delta ct法要求目的基因和內參的擴增效率基本一回 致。如果答不一致,需要對公式進行修正,部分qpcr儀的配套軟體可以做到,直接輸入每對引物的擴增效率。但無論如何,保證高擴增效率是實驗成功的關鍵。如果擴增效率一致,不同ct的曲線顯示出...
請問我這個實時熒光定量PCR融解曲線為什麼是從負值開始的？結果可用嗎
看這個結果有幾個猜想 1 如果之前做實驗的時候，儀器沒有出現過這種情況，有可能是儀器出現錯誤，建議重啟一下，或者改軟體需要重新校準一下。2 從這個結果來看，引物應該是可以用的，主峰也只有一個，特異性還是有的，不過還要參考一下擴增曲線，ct值如果在35個迴圈以內，應該是沒有問題的。怎麼理解熒光定量pc...
熒光定量pcr溶解曲線為什麼會有急劇的上升連著急劇下降
隨著溫度升高，當溫度達到tm值時候，dna就會變性分成單鏈的，此時熒光染料不內能結合nda所以檢測 容的熒光型號越來越弱。你說的出現的峰是熒光性號對溫度求導後得到的曲線圖，出現峰是因為在接近tm值的位置熒光性號下降的斜率很快導致在對溫度求導後出現峰。出現單峰說明沒有非特異性的結合和引物二聚體的產生。...