1樓:南京金益柏生物科技****
這個bai看你自己的設定。duqpcr儀一般是96孔板,zhi最多有5個通dao道版
。理論上,你用一個通道作為內標,權2個孔分別做陰陽性對照。那麼可以做94*4=376個。
當然這只是理論上的最大值,實際操作的時候受很多限制,如多重pcr之間的交叉反應導致無法合孔,樣本量不足等。具體到腫瘤相關的突變檢測試劑盒,目前拿到cfda註冊證的,最多的一個試劑盒可以同時檢測54種突變。
2樓:奔馬的香香豬
bioghsc super multiprobe one step kit 轉為以rna為模板的定量pcr檢測而設計,適合熒光探針法定量pcr分析,可同時檢
版測多個基因,逆權轉錄和定量pcr在一個反應管內一步完成,操作簡便
多重pcr 和多重熒光定量pcr的區別
3樓:多才的英語達人
正常啊,定量pcr很靈敏的,體系稍微變化就會誤差很大,更何況你這樣反應體系都不一樣。所以一般定量結果只是作為佐證,最好別太相信。你想做好,就儘量保證每個體系是一致的,最後結果趨勢是一致的就行了。
4樓:奔馬的香香豬
多重pcr可以同時檢測多個基因,聽我師兄說前段時間他們實驗室用bioghsc kit同時設計了5條引物,逆轉錄和多重定量pcr也是在一個反應管內一步完成的
一次熒光定量pcr反應能檢測多少個突變位點
5樓:龍鳳油洺月
這個bai看你自己的設定du。qpcr儀一般是96孔板,最多有zhi5個通道。理論上,dao
你用一個通回道作為內標
答,2個孔分別做陰陽性對照。那麼可以做94*4=376個。當然這只是理論上的最大值,實際操作的時候受很多限制,如多重pcr之間的交叉反應導致無法合孔,樣本量不足等。
具體到腫瘤相關的突變檢測試劑盒,目前拿到cfda註冊證的,最多的一個試劑盒可以同時檢測54種突變。
pcr和實時熒光定量pcr這兩種有什麼區別
6樓:
原理不同:熒光定量pcr實時監測與dna結合的熒光染料激發的熒光;普通pcr通過檢測插入dna中核算染料的量來測定pcr最終產物量,一般是紫外光.
反應要求:熒光定量對擴增片段有較高的要求,一般為100-300bp;普通定量可以擴增長點的片段.如果不需要檢測產物分子量大小,熒光定量可以不進行電泳就對產物進行定量分析,普通pcr必須電泳.
結果:熒光定量可以實現精確定量,普通pcr則不行.熒光定量體現可以看到整個擴增過程,可以看到擴增效率,溶解溫度,直接得到的標準曲線等,這些是普通pcr無法實現的.
如果還不清楚建議去丁香園等**逛逛,希望可以幫到你
7樓:汗耕順閔凰
熒光原位雜交和熒光定量pcr有什麼區別
實時熒光定量pcr技術,是指在pcr反應體系中加入熒光基團,利用熒光訊號積累實時監測整個pcr程序,最後通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
pcr(聚合酶鏈式反應)是利用dna在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈,低溫(經常是60°c左右)時引物與單鏈按鹼基互補配對的原則結合,再調溫度至dna聚合酶最適反應溫度(72°c左右),dna聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補鏈。
恆溫pcr和實時熒光定量pcr的不同,是不同在實時熒光定量pcr的系統中加入了熒光染料(sybr
green
或taqman
探針等等)。以sybr
green為例,這種染料可以結合在雙鏈的dna上,當pcr不斷進行時,每一次退火生成的雙鏈dna也在增加,熒光染料結合也越多,熒光也越強。在機器中有一個探測熒光的探頭,可以定量檢測熒光的強度,轉換成數值。這樣就可以實時記錄反映體系中dna的反應情況。
熒光pcr更有優勢,因為熒光pcr靈敏度高於恆溫pcr,同樣**也高一些。
熒光定量pcr檢測的靈敏度怎麼確定
8樓:此時情緒
靈敏度即最低檢測限,如果你定了某個濃度為最低檢測濃度,那麼將其重複20次實驗,至少有17次以上應該陽性的。靈敏度的定義是:能夠與零相區分的最小檢測濃度。
熒光定量pcr儀器有哪些優缺點
9樓:摯羋汛訃
最好都有。普通的基因擴增儀(pcr儀)只能夠定性地分析是否存在目標片段。但是**要低
版很多,而權且執行成本也要低很多。不過不能直接得到擴增結果,還需要做電泳檢測。實際中檢測遺傳疾病,品種分子標記篩選,甚至親自鑑定等都可以由普通pcr儀完成。
但是,某些需要定量的實驗就必須用到實時定量pcr了。比如檢測某些病原物的數量(血液乙肝病毒複製程度),特定基因的表達量(比如結合反轉錄做的rna定量分析),某些基因在染色體組中拷貝數(以前往往使用southernblot技術)等等。熒光定量prc一般不需要對擴增產物進行電泳分析,操作相對簡單些,但是耗材實在是貴。
簡單來說,看有沒有用普通pcr儀,看有多少用熒光定量pcr
什麼是實時熒光定量pcr,檢測指標是什麼?
10樓:奔馬的香香豬
實時檢測pcr擴增,在擴增的指數期對起始模板進行定量,在擴增過程中,熒光訊號隨著pcr產物的增加而增強。我們實驗室使用的bioghsc super probe kit pcr實驗檢測dna,測得的迴圈數在28左右,整個pcr過程有4個階段,基線期---指數增長期---線性增長期---平臺期,指數增長期內,pcr有高度重複性,一般的檢測指標是看線性圖譜的擴增曲線的起跳值(ct值)。
11樓:錢塘書生
你要檢測什麼東西啊?
實時熒光定量pcr是檢測模板dna的拷貝數、基因表達量、基因突變等的
12樓:閱微基因
所謂實時熒光定量pcr技術,是指在pcr反應體系中加入熒光基團,利用熒光訊號積累實時監測整個pcr程序,最後通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。參考資料:http:
熒光定量pcr的檢測下限是多少
pcr熒光定量檢測下 復限25拷貝。制 在另外回的一組管子bai中，加入已知拷貝數的dudna同時擴增，每個管zhi子中加入的數 dao量是不同的，但是從最小數目到最大數目的這個範圍涵蓋了樣本中dna拷貝數。pcr反應完成後，把已知拷貝數dna的量和pcr熒光ct值製成標準曲線，再把待測樣本的ct值...
如何看熒光定量pcr的結果，如何看熒光定量PCR的結果
按公式計算 對照組 ct 對照組 ct 目的基因 ct 內參基因 對照組 ct 目的基因 ct 內參基因 實時熒光定量pcr的結果該怎樣分析？1 如果有標準曲線，按照標準曲線計算 2 一般都是相對量，則用delta delta ct方法來計算 3 引物或探針降解 可通過page電泳檢測其完整性 4 ...
熒光定量PCR檢測報告說明一下什麼意思得了什麼病
hsv2為皰疹病毒2型。官的皰疹病毒感染主要由hsv 2型引起。這個檢測結果是正常值。不要擔心 熒光定量pcr檢測報告說明一下什麼意思得了什麼病 陰性的說明你是正常的。pcr是一種通過體外快速擴增病毒核酸的方法測定是否感染病毒的。如果是陽性的話,證明檢測到了病毒的核酸,也就是感染了病毒。熒光定量pc...